Селекторная техника - Selector-technique
Методика выбора представляет собой способ амплификации и мультиплексировать геномную ДНК.
Процесс
Геномная ДНК расщепляется рестрикционными ферментами , подвергается циркуляризации путем гибридизации с селекторами и впоследствии присоединяется к векторной последовательности путем лигирования . Результатом этой процедуры являются кольцевые молекулы ДНК с включенным общим мотивом пары праймеров, которые можно использовать для амплификации с помощью ПЦР или RCA .
Конструкция селектора
Селектор состоит из двух олигонуклеотидов, одного векторного олигонуклеотида и одного селекторного зонда . Вместе они образуют один селектор со специфическими для мишени концами на каждой стороне основного мотива праймера.
Механизмы отбора
- Селекторный зонд гибридизируется с обоими концами выбранной мишени.
- Селекторный зонд гибридизуется одним концом с 3'-концом мишени, а другим концом - с внутренней последовательностью мишени. Выступающий 5'-конец отщепляют с помощью полимеразы Taq .