Высаливание - Salting out

Для получения информации о методе прерывания беременности см. Инстилляционный аборт .

Высаливания (также известный как соли индуцированного осаждения , соль фракционирование , кристаллизация анти-растворитель , осаждение кристаллизация , или заглушая ) представляет собой метод очистки , который использует пониженную растворимость некоторых молекул в растворе очень высокой ионной силы . Высаливание обычно используется для осаждения крупных биомолекул, таких как белки или ДНК. Поскольку концентрация соли, необходимая для осаждения данного белка из раствора, отличается от белка к белку, для осаждения целевого белка можно использовать конкретную концентрацию соли. Этот процесс также используется для концентрирования разбавленных растворов белков. При необходимости для удаления соли можно использовать диализ .

Принцип

Соединения солей диссоциируют в водных растворах. Это свойство эксплуатируется в процессе высаливания. Когда концентрация соли увеличивается, некоторые молекулы воды притягиваются ионами соли , что уменьшает количество молекул воды, доступных для взаимодействия с заряженной частью белка.

Принцип техники засаливания и высаливания, основанный на увеличении концентрации соли.

Есть гидрофобные аминокислоты и гидрофильные аминокислоты в белковых молекулах. После сворачивания белка в водном растворе гидрофобные аминокислоты обычно образуют защищенные гидрофобные области, в то время как гидрофильные аминокислоты взаимодействуют с молекулами сольватации и позволяют белкам образовывать водородные связи с окружающими молекулами воды. Если достаточная часть поверхности белка является гидрофильной, белок можно растворить в воде.

Когда в раствор добавляется соль, происходит более частое взаимодействие между молекулами растворителя и ионами соли. В результате ионы белка и соли конкурируют за взаимодействие с молекулами растворителя, в результате чего становится меньше молекул растворителя, доступных для взаимодействия с молекулами белка, чем раньше. Таким образом, взаимодействия белок-белок становятся сильнее, чем взаимодействия растворитель-растворенное вещество, и молекулы белка связываются, образуя гидрофобные взаимодействия друг с другом. После диссоциации в данном растворителе отрицательно заряженные атомы выбранной соли начинают конкурировать за взаимодействия с положительно заряженными молекулами, присутствующими в растворе. Точно так же положительно заряженные катионы конкурируют за взаимодействия с отрицательно заряженными молекулами растворителя. Этот процесс известен как высаливание.

Мыла легко осаждаются концентрированным солевым раствором, ион металла в соли вступает в реакцию с жирными кислотами, образующими мыло и глицерин .

Заявление

Поскольку разные белки имеют разный состав аминокислот, разные белковые молекулы осаждаются при разных концентрациях солевого раствора.

Нежелательные белки можно удалить из смеси белкового раствора путем высаливания, если известна растворимость белка в различных концентрациях солевого раствора. После удаления осадка фильтрацией или центрифугированием желаемый белок может быть осажден путем изменения концентрации соли до уровня, при котором желаемый белок становится нерастворимым.

Одним из недостатков высаливания при очистке белков является то, что помимо осаждения конкретного представляющего интерес белка также осаждаются загрязнители. Таким образом, для получения более чистого представляющего интерес белка могут потребоваться дополнительные методы очистки, такие как ионообменная хроматография.

Избыточное потребление этанола in vitro после употребления часто сочетается с пищей с высоким содержанием соли и жира, кульминацией чего является неудавшаяся попытка положить конец пьянству, которое в просторечии называется высаливанием. Что обычно может быть уменьшено со временем, человеческая печень может обрабатывать 1 стандартный напиток (14 г чистого этанола) в час.

Смотрите также

Рекомендации

Внешние ссылки