Асимметричная ПЦР - Asymmetric PCR
Асимметричная ПЦР - это разновидность ПЦР, используемая для преимущественной амплификации одной цепи исходной ДНК больше, чем другой. Этот метод находит применение в некоторых типах секвенирования и гибридизационного зондирования, когда требуется наличие только одной из двух комплементарных цепей .
Методология
Асимметричная ПЦР отличается от обычной ПЦР чрезмерным количеством праймеров для выбранной цепи. Из-за медленной (арифметической) амплификации на более поздних стадиях реакции (после того, как ограничивающий праймер израсходован) требуются дополнительные циклы ПЦР.
Модификация этого процесса, известная как Linear-After-The-Exponential-PCR (LATE-PCR) , использует ограничивающий праймер с более высокой температурой плавления, чем избыточный праймер, для поддержания эффективности реакции, поскольку предельная концентрация праймера уменьшается в середине реакции.
Приложения
Асимметричная ПЦР может использоваться для образования одноцепочечной ДНК из двухцепочечной ДНК, которая затем используется для секвенирования ДНК в методе мутагенеза . Одноцепочечная ДНК также важна для генерации аптамеров .