Оксидазный тест - Oxidase test

DMPD
TMPD

Тест на оксидазу используется для определения наличия в организме фермента цитохромоксидазы. Тест используется в качестве вспомогательного средства для дифференциации видов Neisseria, Moraxella, Campylobacter и Pasteurella (положительный результат на оксидазу). Он также используется для дифференциации псевдомонад от родственных видов.

Классификация

Штаммы могут быть либо оксидазо-положительными (OX +), либо оксидазо-отрицательными (OX-).

OX +

OX + обычно означает, что бактерия содержит цитохром с оксидазу (также известный как Комплекс IV ) и поэтому может использовать кислород для производства энергии, превращая O 2 в H 2 O 2 или H 2 O с помощью цепи переноса электронов .

Pseudomonadaceae , как правило , ОХ +

Грамотрицательные диплококки Neisseria и Moraxella являются оксидаза-положительными.

Многие грамотрицательные палочки с изогнутой спиралью также являются оксидазо-положительными, включая Helicobacter pylori , Vibrio cholerae и Campylobacter jejuni .

Переменная оксидазы

Legionella pneumophila может быть оксидазно-положительной.

OX−

OX- обычно означает, что бактерия не содержит цитохром-с-оксидазу и, следовательно, либо не может использовать кислород для производства энергии с цепью переноса электронов, либо использует другой цитохром для передачи электронов кислороду.

Энтеробактерии обычно представляют собой OX−.

Процедуры

  1. Смочите каждый диск примерно четырьмя инокуляционными петлями деионизированной воды.
  2. Используйте петлю для асептического переноса на диск большой массы чистых бактерий.
  3. Наблюдайте за диском до трех минут. Если область инокуляции изменится с темно-синего на темно-бордовый или почти на черный, то результат положительный. Если изменение цвета не происходит в течение трех минут, результат отрицательный.

В качестве альтернативы живые бактерии, культивируемые на чашках с триптиказо-соевым агаром, могут быть получены с использованием стерильной методики с посевом в одну линию. Засеянные чашки инкубируют при 37 ° C в течение 24–48 часов для образования колоний. Следует использовать свежие бактериальные препараты. После того, как колонии вырастут на среде, на поверхность каждого тестируемого организма добавляют 2-3 капли реагента DMPD.

  • Положительный результат теста (OX +) приведет к изменению цвета с фиолетового на пурпурный в течение 10–30 секунд.
  • Отрицательный тест (OX-) приведет к бледно-розовому цвету или отсутствию окраски.

Рекомендации

Больше ссылок:

Американское общество микробиологии, протокол теста на оксидазу. 2013. ASM MicrobeLibrary, 1–9.

Cheng WJ, Lin CW, Wu TG, Su CS, Hsieh M. S. 2013. Калибровка тест-полосок на основе глюкозооксидазы для измерения капиллярной крови с образцами венозной крови, насыщенной кислородом. Clinica Chimica Acta. 415, 152–157.

Corchia L, Hubault R, Quinquenel B, N'Guyen. 2015. Быстро развивающийся конъюнктивит, вызванный Pasteurella Multocida, возникающий после прямой инокуляции капельками животных в хозяине с ослабленным иммунитетом. BMC Ophthalmology 15.1, 21.

Флок С., Аларкон-Гутьеррес Э., Крике С. 2007. Анализ ABTS активности фенолоксидазы в почве. Журнал микробиологических методов. 71, 319–324.

Габи В.Л., Хэдли С. 1957. Практический лабораторный тест для идентификации синегнойной палочки. Журнал бактериологии. 74, 356–358.

Гилани М., Мунир Т., Латиф М., Гилани М., Рехман С., Ансари М., Хафиз А., Наджиб С., Саад Н. 2015. Эффективность дорипенема in vitro против Pseudomonas Aeruginosa и Acinetobacter Baumannii с помощью E-теста. Журнал Колледжа врачей и хирургов Пакистан 25, 726-729.

Kuss S, Tanner EEL, Ordovas-Montanes M, Compton R G. 2017. Электрохимическое распознавание и количественная оценка экспрессии цитохрома C в аэробах / анаэробах с использованием ,, ',' - тетраметил - фенилендиамина (TMPD). Химическая наука 8.11, 7682-7688. Интернет.

Иванова Н.В., Землак Т.С., Ханнер Р.Х., Хеберт П.Д. Н. 2007. Универсальные коктейли праймеров для штрих-кодирования ДНК рыб. Заметки о молекулярной экологии. 7, 544–54.

Принц С. 2009. Практическое руководство по медицинской микробиологии (Jaypee Brothers Medical Publishers (P) Ltd.) 112–112.

Шилдс П., Кэткарт Л. 2013. Протокол теста на оксидазу - Библиотека. Американское общество микробиологов, ASM MicrobeLibrary, 1–5.

Стил К. Дж. 1961. Оксидазная реакция как таксономический инструмент. Журнал общей микробиологии. 25, 297–306.

Zanderigo F et al. 2018. [11C] Связывание гармина с моноаминоксидазой A в мозге: свойства повторного тестирования и неинвазивная количественная оценка. Молекулярная визуализация и биология. 20, 667–681.

Внешние ссылки