Гистологическое - Histopathology


Из Википедии, свободной энциклопедии
Микрофотография показывает сокращение полосы некроз , а гистологическое нахождение инфаркта миокарда (сердечный приступ).

Гистологические (соединение трех греческих слов: ἱστός histos «ткань», πάθος пафос «страдание», и -λογία -logia «исследование») относятся к микроскопическому изучению ткани с целью изучения проявлений заболевания . В частности, в клинической медицине, гистопатология относится к рассмотрению биопсии или хирургического образца с помощью патологоанатома , после того, как образец был обработан и гистологические срезы были помещены на стеклянные слайды. В противоположность этому , Cytopathology осматривает (1) свободные клетки или (2) ткани микро-фрагменты (как «клеточных блоков»).

Коллекция тканей

Гистологическое исследование тканей начинается с хирургии , биопсии или аутопсии . Ткань удаляется из организма или растений , а затем ... часто следуя экспертную диссекцию в свежем состоянии ... помещенное в фиксаторе , который стабилизирует ткань , чтобы предотвратить распад . Наиболее распространенные является закрепляющим формалин (10% нейтральный буферный раствор формальдегида в воде).

Подготовка к гистологии

Затем ткань подготовлен для просмотра под микроскопом с использованием либо химической фиксации или замороженных срезов.

Если большая выборка обеспечивается , например , из хирургической процедуры , то патологоанатом смотрит на образце ткани и выбирает часть , скорее всего , чтобы получить полезный и точный диагноз - эта часть удалена для рассмотрения в процессе широко известный как кассовые или разрезать. Большие образцы разрежут , чтобы правильно расположить их анатомические структуры в кассете. Некоторые образцы (особенно биопсия) могут пройти агар предварительно встраивание , чтобы обеспечить правильную ориентацию ткани в кассете и затем в блоке и затем на диагностической микроскопии слайде. Это затем помещают в пластиковые кассеты для большей части остальной части процесса.

Химическая фиксация

В дополнении к формалину, были использованы другие химические фиксаторы. Но, с появлением иммуногистохимии (IHC) окрашиванием и диагностического молекулярной патологией тестирования на этих образцах проб, формалин стал стандартом химического закрепителем в диагностической гистопатологии человека. Фиксирующий раз для очень маленьких образцов короче, и существуют стандарты в диагностической гистопатологии человека.

обработка

Воду удаляют из образца в последовательных стадиях путем использования возрастающих концентраций спирта . Ксилол используется в последней фазе дегидратации вместо спирта - это происходит потому , что воск используют в следующей стадии растворим в ксилоле , где он не в спирте , позволяя воск проникать (инфильтрата) образца. Этот процесс , как правило , автоматизировано и осуществляется в течение ночи. Воск инфильтрации Затем образец переносил в отдельный образец вложения (обычно металл) контейнера. Наконец, расплавленный воск вводят вокруг образца в контейнере и охлаждают до затвердевания таким образом , чтобы встроить его в блок воска. Этот процесс необходим для обеспечения правильной ориентации образца достаточно прочных для получения тонкого микротома раздела (ы) для слайда.

После того, как воск встроен блок закончена, секции будут вырезаны из него, и, как правило, помещают, чтобы плавать на поверхности, которая распространяется вод на бан раздел вне. Обычно это делается вручную и искусная работа (histotechnologist) с лабораторией персонал делает выбор о том, каких части образца микротомных восковой ленты, чтобы разместить на слайдах. Ряд слайдов, как правило, быть получены из различных уровней по всему блоку. После этого тонкого среза установлен ползун окрашивал и защитный чехол скольжение установлено на ней. Для обычных пятен, автоматический процесс обычно используется; но редко используемые пятна часто делаются вручную.

Замороженный обработка раздела

Второй способ обработки гистологических называется замороженный участок обработки. Это сугубо технический научный метод выполняется обученным histoscientist (специалист ученого медицинской лаборатории в гистопатологии. 5-6 лет степень обучения) В этом методе ткань замораживает и тонко порезанный с помощью микротома , установленного в морозильном ниже холодильном устройстве называется криостат . Тонкие замороженные срезы смонтированы на предметное стекло, фиксированной немедленно и кратковременно в жидком фиксаторе, и окрашивали с использованием аналогичных методов окрашивания , как традиционных восковых срезов. Преимущества этого метода является быстрое время обработки, меньше требования оборудования и меньшую потребность в вентиляции в лаборатории. Недостатком является низкое качество конечного слайда. Он используется в интраоперационной патологии для определения , которые могут помочь в выборе следующего шага в операции во время этой хирургической сессии (например, чтобы предварительно определить четкость края резекции опухоли во время операции).

Окрашивание обработанных гистологических слайдов

Это может быть сделано для слайдов , обработанных химической фиксацией или замороженных секций горок. Чтобы увидеть ткани под микроскопом срезы окрашивают с одним или более пигментов . Целью окрашивания является выявление клеточных компонентов; counterstains используются , чтобы обеспечить контраст.

Наиболее часто используемый краситель в гистопатологии представляет собой сочетание гематоксилином и эозином (часто сокращенно Н & Е). Гематоксилин используется для окрашивания ядер синий , в то время как эозином пятна цитоплазмы и внеклеточной соединительной ткани матрицы розовый . Существуют сотни различных других методов , которые были использованы для селективного окрашивания клеток. Другие соединения , используемые для секций цвета ткани включают Safranin , масляный красный O , конго красный , солей серебра и искусственные красителей. Гистохимия относится к науке с помощью химических реакций между лабораторными химическими веществами и компонентами в пределах ткани. Широко выполняются гистохимические методами являются прусской синим Перлз реакция, используется для демонстрации отложения железа в таких заболеваниях , как гемохроматоз .

В последнее время антитело было использовано для окрашивания конкретных белков , липидов и углеводов . Вызывается иммуногистохимии , этот метод значительно увеличило способность специфически идентифицировать категории клеток под микроскопом. Другие современные методы включают гибридизация для выявления специфических ДНК или РНК молекул. Эти методы окраски антитела часто требуют использования замороженного раздела гистологии. Эти процедуры выше также проводятся в лаборатории под пристальным вниманием и точность с помощью квалифицированного специалиста медицинских лабораторного ученого (Histoscientist) Цифровые камеры все чаще используются для захвата гистологических изображений.

интерпретация

Гистологические слайды исследуют под микроскопом с помощью патологоанатома , с медицинской точки зрения квалифицированного специалиста , который закончил признанную программу обучения. Этот медицинский диагноз формулируется как доклад патологии , описывающего гистологические выводы и мнения патологоанатома. В случае рака , это представляет собой диагноз ткани , необходимый для большинства протоколов лечения. В удалении рака , патолог укажет ли хирургический край очищается, или участвует (остаточный рак остается позади). Это делается с помощью либо Loafing хлеба или CCPDMA метод обработки.

В инфаркта миокарда

После инфаркта миокарда (сердечный приступ), не гистопатологии не видны первые ~ 30 минут. Единственный возможный знак первые 4 часа является волнистость волокон на границе. Позже, однако, некроз коагуляции начинается с отеком и кровоизлиянием. Через 12 часов, то можно увидеть кариопикноз и гиперэозинофилию миоцитов с сжатием зоны некроза в полях, а также начало нейтрофильной инфильтрации. На 1 - 3 дней происходят продолжение коагуляции некроз с потерей ядер и бороздок и увеличением инфильтрации нейтрофилов в интерстиции. До конца первой недели после инфаркта не начинает распад омертвевших мышечных волокон, некроз нейтрофилов и начала удаления макрофагов мертвых клеток на границе, что увеличивает последующие дни. Через недели есть также начало формирования грануляционной ткани на краях, который созревает в течение следующего месяца, и получает повышенное отложение коллагена и сниженную клеточность до тех пор , инфаркт рубцевание не будет полностью зрелым примерно через 2 месяца после инфаркта.

Смотрите также

Рекомендации

внешняя ссылка