Генетически модифицированный организм - Genetically modified organism

Генетически модифицированный организм ( ГМО ) является любой организм , чей генетический материал был изменен с помощью методов генной инженерии . Точное определение генетически модифицированного организма и того, что составляет генная инженерия, варьируется, наиболее распространенным из которых является организм, измененный таким образом, который «не происходит естественным образом в результате спаривания и / или естественной рекомбинации ». Генетически модифицировано (ГМ) множество организмов, от животных до растений и микроорганизмов. Гены были перенесены в пределах одного и того же вида , между видами (создавая трансгенные организмы) и даже между царствами . Могут быть введены новые гены или эндогенные гены могут быть усилены, изменены или исключены .

Создание генетически модифицированного организма - это многоэтапный процесс. Генные инженеры должны выделить ген, который они хотят вставить в организм-хозяин, и объединить его с другими генетическими элементами, включая область промотора и терминатора и часто селектируемый маркер . Доступен ряд методов для вставки изолированного гена в геном хозяина . Последние достижения в области использования методов редактирования генома , в частности CRISPR , значительно упростили производство ГМО. Герберт Бойер и Стэнли Коэн создали первый генетически модифицированный организм в 1973 году, бактерию, устойчивую к антибиотику канамицину . Первое генетически модифицированное животное , мышь, было создано в 1974 году Рудольфом Яенишем , а первое растение было выращено в 1983 году. В 1994 году был выпущен томат Flavr Savr - первый коммерческий генетически модифицированный корм . Первым генетически модифицированным животным, которое будет коммерциализировано, был GloFish (2003), а первым генетически модифицированным животным, одобренным для использования в пищу, стал лосось AquAdvantage в 2015 году.

Бактерии - это организмы, которые легче всего создать, и они использовались для исследований, производства продуктов питания, промышленной очистки белка (включая лекарства), сельского хозяйства и искусства. Есть возможность использовать их в экологических целях или в медицине. Грибы были созданы для тех же целей. Вирусы играют важную роль в качестве переносчиков генетической информации для других организмов. Это использование особенно актуально для генной терапии человека . Есть предложения удалить вирулентные гены из вирусов для создания вакцин. Растения были спроектированы для научных исследований, создания новых цветов растений, доставки вакцин и создания улучшенных культур. Генетически модифицированные культуры являются наиболее спорными ГМО, несмотря на то, что они приносят наибольшую пользу для здоровья человека и окружающей среды. Большинство из них разработаны с учетом устойчивости к гербицидам или насекомых. Золотой рис содержит три гена, которые увеличивают его пищевую ценность . Другие перспективы ГМ-культур - это использование биореакторов для производства биофармацевтических препаратов , биотоплива или лекарств.

Как правило, животных гораздо труднее трансформировать, и подавляющее большинство из них все еще находится на стадии исследований. Млекопитающие являются лучшими модельными организмами для человека, поэтому генетически модифицированные организмы напоминают серьезные человеческие заболевания, важные для открытия и разработки методов лечения. Белки человека, экспрессируемые у млекопитающих, с большей вероятностью будут похожи на их естественные аналоги, чем белки, экспрессируемые в растениях или микроорганизмах. Животноводство модифицируется с целью улучшения экономически важных характеристик, таких как скорость роста, качество мяса, состав молока, устойчивость к болезням и выживаемость. Генетически модифицированная рыба используется в научных исследованиях, в качестве домашних животных и в качестве источника пищи. Генная инженерия была предложена как способ борьбы с комарами, переносчиками многих смертельных болезней. Хотя генная терапия человека все еще относительно нова, она использовалась для лечения генетических заболеваний, таких как тяжелый комбинированный иммунодефицит и врожденный амавроз Лебера .

Хотя существует научный консенсус относительно безопасности ГМО, отрицатели утверждают, что они небезопасны. Многие из них связаны с ГМ-культурами, а также с тем, безопасна ли пища, производимая из них, и какое влияние их выращивание окажет на окружающую среду. К другим проблемам относятся объективность и строгость регулирующих органов, загрязнение не-генетически модифицированных продуктов питания, контроль над поставками продуктов питания , патентование жизни и использование прав интеллектуальной собственности . Хотя существует научный консенсус в отношении того, что доступные в настоящее время продукты питания, полученные из ГМ-культур, не представляют большего риска для здоровья человека, чем обычные продукты питания, безопасность ГМО-продуктов питания является ведущей проблемой для отрицателей. Поток генов , воздействие на организмы, не являющиеся мишенями, и побег - основные экологические проблемы. Страны приняли меры регулирования для решения этих проблем. Существуют различия в правилах выпуска ГМО между странами, причем некоторые из наиболее заметных различий наблюдаются между США и Европой. Ключевые вопросы, касающиеся регулирующих органов, включают вопрос о том, следует ли маркировать ГМ-продукты питания и статус генетически отредактированных организмов.

Определение

Что представляет собой генетически модифицированный организм (ГМО), не ясно и широко варьируется между странами, международными организациями и другими сообществами.

В самом широком смысле определение ГМО может включать все, что было изменено в генах, в том числе по природе.

В менее широком смысле он может охватывать каждый организм, гены которого были изменены людьми, включая все сельскохозяйственные культуры и домашний скот. В 1993 году Энциклопедия Британика определяется генетической инженерии , как «любой из широкого спектра методов ... среди них искусственное осеменение , в пробирке оплодотворение ( например ,„пробирка“дети), банки спермы , клонированием , и манипуляции генов.» Европейский союз (ЕС) включал в себя так же широкое определение в начале обзоров, в частности , упомянуть ГМО вырабатываться « Селекция и других средств искусственного отбора». Эти определения были незамедлительно скорректированы с добавлением ряда исключений в результате давления научных и фермерских сообществ, а также развития науки. Позднее из определения ЕС были исключены методы традиционного разведения, оплодотворения in vitro, индукции полиплоидии , мутационного разведения и слияния клеток, в которых не используются рекомбинантные нуклеиновые кислоты или генетически модифицированный организм.

Другим подходом было определение, данное Продовольственной и сельскохозяйственной организацией Объединенных Наций , Всемирной организацией здравоохранения и Европейской комиссией, в котором говорится, что организмы должны быть изменены таким образом, который «не происходит в естественных условиях путем спаривания и / или естественной рекомбинации ». Прогресс в науке, такой как открытие горизонтального переноса генов, являющегося относительно обычным природным явлением, еще больше усугубил путаницу в отношении того, что «происходит естественным образом», что привело к дальнейшим корректировкам и исключениям. Есть примеры сельскохозяйственных культур, которые подходят под это определение, но обычно не считаются ГМО. Например, тритикале зерновых культур был полностью разработан в лаборатории в 1930 году с использованием различных методов для изменения его генома.

Генно-инженерный организм (ГЕО) может считаться более точным термином по сравнению с ГМО при описании геномов организмов, которые непосредственно подвергались манипуляции с помощью биотехнологии. В Картахенском протоколе по биобезопасности 2000 года использовался синоним « живой измененный организм» ( ЖИО ) и определялся его как «любой живой организм, обладающий новой комбинацией генетического материала, полученного с помощью современной биотехнологии». Современная биотехнология далее определяется как «методы нуклеиновой кислоты in vitro, включая рекомбинантную дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) и прямую инъекцию нуклеиновой кислоты в клетки или органеллы, или слияние клеток за пределами таксономического семейства».

Термин ГМО первоначально обычно не использовался учеными для описания генно-инженерных организмов до тех пор, пока использование ГМО не стало обычным явлением в популярных СМИ. Соединенные Штаты департамента сельского хозяйства США (USDA) считает ГМО быть растений или животных с наследственными изменениями с помощью генной инженерии или традиционными методами, в то время как ГЭП конкретно относится к организмам с генами введены, устранен, или переставить с помощью молекулярной биологии, в частности , рекомбинантных ДНК методик, такие как трансгенез .

Определения сосредоточены на процессе больше, чем на продукте, что означает, что могут быть ГМО и не-ГМО с очень похожими генотипами и фенотипами. Это привело к тому, что ученые причислили его к категории бессмысленной с научной точки зрения, заявив, что невозможно сгруппировать все различные типы ГМО под одним общим определением. Это также вызвало проблемы у органических организаций и групп, стремящихся запретить ГМО. Это также создает проблемы при разработке новых процессов. Текущие определения появились до того, как редактирование генома стало популярным, и есть некоторая путаница относительно того, являются ли они ГМО. ЕС постановил, что они меняют свое определение ГМО, чтобы включить в него «организмы, полученные путем мутагенеза », но исключил их из регулирования на основании «длительного периода безопасности» и того, что они «традиционно использовались в ряде приложений». В отличие от этого, Министерство сельского хозяйства США постановило, что организмы, отредактированные генами, не считаются ГМО.

Еще большая непоследовательность и путаница связаны с различными схемами маркировки «без ГМО» или «без ГМО» в маркетинге пищевых продуктов, когда даже такие продукты, как вода или соль, не содержат никаких органических веществ и генетического материала (и, следовательно, не могут быть генетически модифицированные по определению) маркируются, чтобы создать впечатление «более здорового».

Производство

Генная пушка использует биолистику для вставки ДНК в ткань растений.

Создание генетически модифицированного организма (ГМО) - это многоэтапный процесс. Генные инженеры должны выделить ген, который они хотят вставить в организм-хозяин. Этот ген можно взять из клетки или синтезировать искусственно . Если выбранный ген или донорский организм геном хорошо изучен он уже может быть доступен из генетической библиотеки . Затем ген комбинируют с другими генетическими элементами, включая область промотора и терминатора и селективный маркер .

Доступен ряд методов для встраивания изолированного гена в геном хозяина . Бактерии можно заставить захватить чужеродную ДНК, как правило, с помощью теплового шока или электропорации . ДНК обычно вводят в клетки животных с помощью микроинъекции , где ее можно вводить через ядерную оболочку клетки непосредственно в ядро или с помощью вирусных векторов . В растения ДНК часто вставляют с использованием рекомбинации , опосредованной Agrobacterium , биолистики или электропорации.

Поскольку генетическим материалом трансформируется только одна клетка, организм должен быть регенерирован из этой единственной клетки. У растений это достигается путем культивирования тканей . У животных необходимо убедиться, что встроенная ДНК присутствует в эмбриональных стволовых клетках . Дальнейшее тестирование с использованием ПЦР , гибридизации по Саузерну и секвенирования ДНК проводится для подтверждения того, что организм содержит новый ген.

Традиционно новый генетический материал случайным образом вставлялся в геном хозяина. Методы нацеливания на гены, которые создают двухцепочечные разрывы и используют системы репарации естественной гомологичной рекомбинации клеток , были разработаны для нацеливания вставки в точные места . При редактировании генома используются искусственно созданные нуклеазы, которые создают разрывы в определенных точках. Существует четыре семейства сконструированных нуклеаз: мегануклеазы , нуклеазы цинковых пальцев , эффекторные нуклеазы, подобные активаторам транскрипции (TALEN), и система Cas9-guideRNA (адаптированная из CRISPR). TALEN и CRISPR - два наиболее часто используемых, и каждый из них имеет свои преимущества. TALEN обладают большей целевой специфичностью, в то время как CRISPR проще в разработке и более эффективен.

История

Герберт Бойер (на фото) и Стэнли Коэн создали первый генетически модифицированный организм в 1973 году.

Люди были одомашнены растения и животные , так как около 12 000 г. до н.э., используя селекцию или искусственный отбор (в отличие от естественного отбора ). Процесс селективного разведения , в котором организмы с желаемыми признаками (и, следовательно, с желаемыми генами ) используются для разведения следующего поколения, а организмы без признака не размножаются, является предшественником современной концепции генетической модификации. Различные достижения в области генетики позволили людям напрямую изменять ДНК и, следовательно, гены организмов. В 1972 году Пол Берг создал первую рекомбинантную молекулу ДНК , объединив ДНК вируса обезьяны с ДНК вируса лямбда .

Герберт Бойер и Стэнли Коэн создали первый генетически модифицированный организм в 1973 году. Они взяли ген у бактерии, обеспечивающей устойчивость к антибиотику канамицину , вставили его в плазмиду и затем заставили другие бактерии включить плазмиду. Бактерии, успешно включившие плазмиду, затем смогли выжить в присутствии канамицина. Бойер и Коэн экспрессировали в бактериях другие гены. Это включало гены жабы Xenopus laevis в 1974 году, создав первый ГМО, экспрессирующий ген из организма из другого царства .

В 1974 году Рудольф Яениш создал первое генетически модифицированное животное.

В 1974 году Рудольф Яениш создал трансгенную мышь , введя чужеродную ДНК в ее эмбрион, что сделало ее первым трансгенным животным в мире. Однако прошло еще восемь лет, прежде чем были созданы трансгенные мыши, которые передали трансген своему потомству. В 1984 году были созданы генетически модифицированные мыши, несущие клонированные онкогены , предрасполагающие их к развитию рака. Мыши с удаленными генами (так называемые мыши с нокаутом ) были созданы в 1989 году. Первый трансгенный домашний скот был получен в 1985 году, а первым животным, синтезировавшим трансгенные белки в своем молоке, были мыши в 1987 году. Мыши были сконструированы для производства тканевого активатора плазминогена человека , белок, участвующий в разрушении тромбов .

В 1983 году первое генетически модифицированное растение было разработано Майклом Беваном , Ричардом Б. Флавеллом и Мэри-Делл Чилтон . Они заразили табак Agrobacterium, трансформированной геном устойчивости к антибиотикам, и с помощью методов культивирования тканей смогли вырастить новое растение, содержащее ген устойчивости. Генная пушка была изобретена в 1987 году, что позволяет трансформацию растений , не восприимчивых к Agrobacterium - инфекции. В 2000 году золотой рис, обогащенный витамином А, стал первым растением с повышенной питательной ценностью.

В 1976 году Герберт Бойер и Роберт Свансон основали первую компанию генной инженерии Genentech ; год спустя компания произвела человеческий белок ( соматостатин ) в кишечной палочке . Genentech объявила о производстве генно-инженерного человеческого инсулина в 1978 году. Вырабатываемый бактериями инсулин, известный как гумулин , был одобрен для выпуска Управлением по контролю за продуктами и лекарствами в 1982 году. В 1988 году первые человеческие антитела были произведены на растениях. В 1987 году штамм Pseudomonas syringae стал первым генетически модифицированным организмом, выпущенным в окружающую среду после опрыскивания им поля клубники и картофеля в Калифорнии.

Первая генетически модифицированная культура , устойчивое к антибиотикам растение табака, было выращено в 1982 году. Китай был первой страной, которая начала коммерциализацию трансгенных растений, представив устойчивый к вирусам табак в 1992 году. В 1994 году Calgene получила разрешение на коммерческое производство томатов Flavr Savr. первый генетически модифицированный корм . Также в 1994 году Европейский Союз одобрил табак, устойчивый к гербициду бромоксинилу , что сделало его первой генно-инженерной культурой, коммерчески доступной в Европе. Устойчивый к насекомым картофель был одобрен для выпуска в США в 1995 году, а к 1996 году было получено разрешение на коммерческое выращивание 8 трансгенных культур и одной цветочной культуры (гвоздики) в 6 странах, а также в ЕС.

В 2010 году ученые Института Дж. Крейга Вентера объявили, что они создали первый синтетический бактериальный геном . Они назвали его Синтией, и это была первая в мире синтетическая форма жизни .

Первым генетически модифицированным животным, которое будет коммерциализировано, была GloFish , рыба-зебра с добавленным флуоресцентным геном, который позволяет ей светиться в темноте под ультрафиолетовым светом . Он был выпущен на рынок США в 2003 году. В 2015 году лосось AquAdvantage стал первым генетически модифицированным животным, одобренным для использования в пищу. Разрешение на рыбу, выращенную в Панаме и продаваемую в США. Лосось был трансформирован с помощью гена, регулирующего гормон роста, от тихоокеанского чавычи и промотора от океанской надувной рыбы, что позволило ему расти круглый год, а не только весной и летом.

Бактерии

Слева: бактерии, трансформированные pGLO при окружающем освещении.
Справа: бактерии, трансформированные с помощью pGLO, визуализированы в ультрафиолетовом свете.

Бактерии были первыми организмами, которые были генетически модифицированы в лаборатории из-за относительной легкости модификации их хромосом. Эта легкость сделала их важными инструментами для создания других ГМО. Гены и другая генетическая информация от широкого круга организмов может быть добавлена ​​к плазмиде и вставлена ​​в бактерии для хранения и модификации. Бактерии дешевы, их легко выращивать, клонировать , они быстро размножаются и могут храниться при -80 ° C почти неограниченное время. Как только ген выделен, он может храниться внутри бактерий, обеспечивая неограниченный запас для исследований. Большое количество пользовательских плазмид позволяет относительно легко манипулировать ДНК, выделенной из бактерий.

Простота использования сделала их отличным инструментом для ученых, изучающих функцию и эволюцию генов . Простейшие модельные организмы происходят от бактерий, и большая часть нашего раннего понимания молекулярной биологии пришла из изучения кишечной палочки . Ученые могут легко манипулировать генами бактерий и комбинировать их для создания новых или разрушенных белков и наблюдать за тем, как это влияет на различные молекулярные системы. Исследователи объединили гены бактерий и архей , что привело к пониманию того, как эти двое расходились в прошлом. В области синтетической биологии они использовались для тестирования различных синтетических подходов, от синтеза геномов до создания новых нуклеотидов .

Бактерии использовались в производстве продуктов питания в течение длительного времени, и были разработаны и отобраны определенные штаммы для этой работы в промышленных масштабах. Их можно использовать для производства ферментов , аминокислот , ароматизаторов и других соединений, используемых в производстве продуктов питания. С появлением генной инженерии в эти бактерии можно легко внести новые генетические изменения. Большинство бактерий, производящих пищу, являются молочнокислыми бактериями , и именно здесь было проведено большинство исследований в области генетической инженерии бактерий, производящих пищу. Бактерии можно модифицировать, чтобы они работали более эффективно, уменьшали образование токсичных побочных продуктов, увеличивали выход, создавали улучшенные соединения и устраняли ненужные пути . Пищевые продукты из генетически модифицированных бактерий включают альфа-амилазу , которая превращает крахмал в простые сахара, химозин , который свертывает молочный белок для производства сыра, и пектинэстеразу , улучшающую прозрачность фруктового сока. Большинство из них производится в США, и, хотя существуют правила, разрешающие производство в Европе, по состоянию на 2015 год там нет пищевых продуктов, полученных из бактерий.

Генетически модифицированные бактерии используются для производства большого количества белков для промышленного использования. Обычно бактерии выращивают до большого объема до того, как активируется ген, кодирующий белок. Затем бактерии собирают и из них очищают желаемый белок. Высокая стоимость экстракции и очистки означает, что в промышленных масштабах производятся только дорогостоящие продукты. Большинство этих продуктов представляют собой человеческие белки, используемые в медицине. Многие из этих белков невозможно или трудно получить естественными методами, и они с меньшей вероятностью будут заражены патогенами, что делает их более безопасными. Первым применением ГМ-бактерий в медицине было производство белкового инсулина для лечения диабета . Другие производимые лекарства включают факторы свертывания крови для лечения гемофилии , гормон роста человека для лечения различных форм карликовости , интерферон для лечения некоторых видов рака, эритропоэтин для пациентов с анемией и тканевый активатор плазминогена, который растворяет сгустки крови. Вне медицины они использовались для производства биотоплива . Существует интерес к разработке системы внеклеточной экспрессии внутри бактерий, чтобы снизить затраты и сделать производство большего количества продуктов экономичным.

С более глубоким пониманием роли, которую микробиом играет в здоровье человека, появляется возможность лечить заболевания, генетически изменяя бактерии, чтобы они сами были терапевтическими агентами. Идеи включают изменение кишечных бактерий, чтобы они уничтожали вредные бактерии, или использование бактерий для замены или увеличения дефицитных ферментов или белков. Одно из направлений исследований - модифицировать Lactobacillus , бактерии, которые естественным образом обеспечивают некоторую защиту от ВИЧ , с помощью генов, которые еще больше усиливают эту защиту. Если бактерии не образуют колоний внутри пациента, человек должен повторно проглотить модифицированные бактерии, чтобы получить необходимые дозы. Предоставление бактериям возможности образовать колонию может обеспечить более долгосрочное решение, но также может вызвать проблемы безопасности, поскольку взаимодействие между бактериями и человеческим телом менее изучено, чем с традиционными лекарствами. Есть опасения, что горизонтальный перенос генов другим бактериям может иметь неизвестные эффекты. По состоянию на 2018 год проводятся клинические испытания, в которых проверяется эффективность и безопасность этих методов лечения.

Уже более века бактерии используются в сельском хозяйстве. Посевы были привиты с ризобиями (и совсем недавно Azospirillum ) , чтобы увеличить их производство или позволить им быть выращены за пределами их первоначального обитания . Применение Bacillus thuringiensis (Bt) и других бактерий может помочь защитить урожай от заражения насекомыми и болезней растений. С развитием генной инженерии этими бактериями манипулировали для повышения эффективности и расширения круга хозяев. Маркеры также были добавлены, чтобы помочь в отслеживании распространения бактерий. Бактерии, которые естественным образом колонизируют определенные культуры, также были изменены, в некоторых случаях для экспрессии генов Bt, ответственных за устойчивость к вредителям. Pseudomonas штаммы бактерий вызывают повреждение заморозки зародышеобразования воды в кристаллы льда вокруг себя. Это привело к развитию ледяных бактерий , у которых были удалены гены образования льда. При нанесении на сельскохозяйственные культуры они могут конкурировать с немодифицированными бактериями и обеспечивать некоторую морозостойкость.

Это произведение сделано с использованием бактерий, модифицированных для экспрессии флуоресцентных белков 8 разных цветов .

Другие применения генетически модифицированных бактерий включают биоремедиацию , когда бактерии используются для преобразования загрязнителей в менее токсичную форму. Генная инженерия может повысить уровень ферментов, используемых для разложения токсина или сделать бактерии более стабильными в условиях окружающей среды. Bioart также был создан с использованием генетически модифицированных бактерий. В 1980-х годах художник Джон Дэвис и генетик Дана Бойд преобразовали германский символ женственности (ᛉ) в двоичный код, а затем в последовательность ДНК, которая затем была выражена в Escherichia coli . Это было сделано в 2012 году, когда целая книга была закодирована на ДНК. Картины также создавались с использованием бактерий, трансформированных флуоресцентными белками.

Вирусы

Вирусы часто модифицируются, чтобы их можно было использовать в качестве векторов для встраивания генетической информации в другие организмы. Этот процесс называется трансдукцией, и в случае успеха реципиент введенной ДНК становится ГМО. Разные вирусы обладают разной эффективностью и возможностями. Исследователи могут использовать это для контроля различных факторов; включая целевое местоположение, размер вставки и продолжительность экспрессии гена. Любые опасные последовательности, присущие вирусу, должны быть удалены, в то время как те, которые позволяют эффективно доставлять ген, должны быть сохранены.

Хотя вирусные векторы можно использовать для встраивания ДНК практически в любой организм, это особенно актуально из-за их потенциала в лечении заболеваний человека. Хотя в основном все еще находятся на стадии испытаний, были достигнуты некоторые успехи в использовании генной терапии для замены дефектных генов. Это наиболее очевидно при лечении пациентов с тяжелым комбинированным иммунодефицитом, возникающим из-за дефицита аденозиндезаминазы (ADA-SCID), хотя развитие лейкемии у некоторых пациентов с ADA-SCID вместе со смертью Джесси Гелсингера в испытании 1999 г. остановило развитие этого заболевания. подход на долгие годы. В 2009 году был достигнут еще один прорыв, когда восьмилетний мальчик с врожденным амаврозом Лебера вернулся к нормальному зрению, а в 2016 году GlaxoSmithKline получила разрешение на коммерциализацию генной терапии для лечения ADA-SCID. По состоянию на 2018 год ведется значительное количество клинических испытаний , включая лечение гемофилии , глиобластомы , хронической гранулематозной болезни , муковисцидоза и различных видов рака .

Наиболее распространенный вирус, используемый для доставки генов, происходит из аденовирусов, поскольку они могут нести до 7,5 т.п.н. чужеродной ДНК и инфицировать относительно широкий спектр клеток-хозяев, хотя известно, что они вызывают иммунные ответы у хозяина и обеспечивают только краткосрочную экспрессию. . Другими распространенными векторами являются аденоассоциированные вирусы , которые имеют более низкую токсичность и более длительную экспрессию, но могут нести только около 4 килобайт ДНК. Вирусы простого герпеса представляют собой многообещающие векторы, имеющие несущую способность более 30 килобайт и обеспечивающие долгосрочную экспрессию, хотя они менее эффективны в доставке генов, чем другие векторы. Лучшими векторами для долгосрочной интеграции гена в геном хозяина являются ретровирусы , но их склонность к случайной интеграции проблематична. Лентивирусы являются частью того же семейства, что и ретровирусы, с тем преимуществом, что заражают как делящиеся, так и неделящиеся клетки, тогда как ретровирусы нацелены только на делящиеся клетки. Другие вирусы, которые использовались в качестве переносчиков, включают альфавирусы , флавивирусы , вирусы кори , рабдовирусы , вирус болезни Ньюкасла , поксвирусы и пикорнавирусы .

Большинство вакцин состоят из вирусов, которые были аттенуированы , обезврежены, ослаблены или убиты каким-либо образом, так что их вирулентные свойства больше не эффективны. Генная инженерия теоретически может быть использована для создания вирусов с удаленными вирулентными генами. Это не влияет на инфекционность вирусов , вызывает естественный иммунный ответ, и нет никаких шансов, что они восстановят свою функцию вирулентности, которая может происходить с некоторыми другими вакцинами. Как таковые, они обычно считаются более безопасными и более эффективными, чем обычные вакцины, хотя остаются опасения по поводу нецелевой инфекции, потенциальных побочных эффектов и горизонтального переноса генов на другие вирусы. Другой потенциальный подход - использовать векторы для создания новых вакцин от болезней, для которых нет доступных вакцин, или вакцин, которые не работают эффективно, таких как СПИД , малярия и туберкулез . Самая эффективная вакцина против туберкулеза, вакцина Bacillus Calmette – Guérin (BCG) , обеспечивает лишь частичную защиту. Модифицированная вакцина, экспрессирующая антиген M. tuberculosis, способна усилить защиту от БЦЖ. Было показано, что его безопасно использовать в исследованиях фазы II , хотя и не так эффективно, как предполагалось изначально. Другие вакцины на основе векторов уже одобрены, и многие другие вакцины находятся в стадии разработки.

Еще одно потенциальное использование генетически модифицированных вирусов - изменить их так, чтобы они могли непосредственно лечить болезни. Это может происходить путем экспрессии защитных белков или путем прямого воздействия на инфицированные клетки. В 2004 году исследователи сообщили, что генетически модифицированный вирус, использующий эгоистичное поведение раковых клеток, может предложить альтернативный способ уничтожения опухолей. С тех пор несколько исследователей разработали генетически модифицированные онколитические вирусы , перспективные для лечения различных типов рака . В 2017 году исследователи генетически модифицировали вирус для экспрессии белков дефенсина шпината . Вирус вводили апельсиновым деревьям для борьбы с болезнью позеленения цитрусовых, которая снизила производство апельсинов на 70% с 2005 года.

Естественные вирусные заболевания, такие как миксоматоз и геморрагическая болезнь кроликов , используются для борьбы с популяциями вредителей. Со временем выжившие вредители становятся устойчивыми, что побуждает исследователей искать альтернативные методы. В лаборатории были созданы генетически модифицированные вирусы, которые делают животных-мишеней бесплодием посредством иммуноконтрацепции , а также другие вирусы, нацеленные на стадию развития животного. Использование этого подхода вызывает опасения относительно сдерживания вирусов и межвидовой инфекции. Иногда один и тот же вирус можно модифицировать для противопоставления. Генетическая модификация вируса миксомы была предложена для сохранения европейских диких кроликов на Пиренейском полуострове и помощи в регулировании их содержания в Австралии. Для защиты иберийских видов от вирусных заболеваний вирус миксомы был генетически модифицирован для иммунизации кроликов, в то время как в Австралии тот же вирус миксомы был генетически модифицирован для снижения фертильности австралийской популяции кроликов.

Помимо биологии, ученые использовали генетически модифицированный вирус для создания литий-ионной батареи и других наноструктурированных материалов. Можно сконструировать бактериофаги, чтобы экспрессировать модифицированные белки на своей поверхности и объединять их в определенные структуры (метод, называемый фаговым дисплеем ). Эти структуры имеют потенциальное использование для хранения и генерации энергии, биочувствительности и регенерации тканей с некоторыми новыми материалами, которые в настоящее время производятся, включая квантовые точки , жидкие кристаллы , нанокольца и нановолокна . Батарея была сделана путем создания бактерий M13, которые покрывали себя фосфатом железа, а затем собирались на углеродной нанотрубке . Это создало среду с высокой проводимостью для использования в катоде, позволяющую быстро передавать энергию. Они могут быть построены при более низких температурах с использованием нетоксичных химикатов, что сделает их более экологически чистыми.

Грибы

Грибы могут использоваться для многих из тех же процессов, что и бактерии. Для промышленного применения дрожжи сочетают в себе бактериальные преимущества одноклеточного организма, которым легко манипулировать и который легко выращивать, с передовыми модификациями белка, обнаруженными у эукариот . Их можно использовать для производства больших сложных молекул для использования в пищевых продуктах, фармацевтических препаратах, гормонах и стероидах. Дрожжи важны для производства вина, и по состоянию на 2016 год два генетически модифицированных дрожжа, участвующих в ферментации вина, были коммерциализированы в Соединенных Штатах и ​​Канаде. Один увеличивает эффективность яблочно-молочной ферментации , а другой предотвращает образование опасных соединений этилкарбамата во время ферментации. Также были достигнуты успехи в производстве биотоплива из генетически модифицированных грибов.

Грибы, являясь наиболее распространенными возбудителями насекомых, являются привлекательными биопестицидами . В отличие от бактерий и вирусов, они обладают тем преимуществом, что заражают насекомых только при контакте, хотя химические пестициды уступают им по эффективности . Генная инженерия может улучшить вирулентность, обычно за счет добавления большего количества вирулентных белков, увеличения скорости инфицирования или повышения устойчивости спор . Многие переносчики болезней чувствительны к энтомопатогенным грибам . Привлекательной целью для биологической борьбы являются комары , переносчики ряда смертельных заболеваний, включая малярию , желтую лихорадку и лихорадку денге . Комары могут быстро развиваться , так что становится балансированием убивать их до Plasmodium они несут становится инфекционным заболеванием, но не так быстро , что они становятся устойчивыми к грибам. С помощью генной инженерии грибов, таких как Metarhizium anisopliae и Beauveria bassiana, чтобы задержать развитие заразности комаров, давление отбора, направленное на выработку устойчивости, снижается. Другая стратегия - добавить белки к грибам, которые блокируют передачу малярии, или полностью удалить плазмодий .

Ген отредактировал гриб , чтобы он сопротивлялся потемнению, что продлило срок его хранения . В процессе использовался CRISPR, чтобы выбить ген, кодирующий полифенолоксидазу . Поскольку он не привносил в организм чужеродную ДНК, считалось, что он не регулируется существующими структурами ГМО и, как таковой, является первым организмом, отредактированным с помощью CRISPR, который был одобрен для выпуска. Это усилило споры о том, следует ли рассматривать генно-отредактированные организмы как генетически модифицированные организмы и как их следует регулировать.

Растения

Культура ткани, используемая для регенерации Arabidopsis thaliana

Растения были спроектированы для научных исследований, чтобы отображать новые цвета цветов, доставлять вакцины и создавать улучшенные урожаи. Многие растения являются плюрипотентными , что означает, что одна клетка зрелого растения может быть собрана и при правильных условиях может развиться в новое растение. Этой способностью могут воспользоваться генные инженеры; путем отбора клеток, которые были успешно трансформированы во взрослом растении, затем можно вырастить новое растение, содержащее трансген в каждой клетке, посредством процесса, известного как культура ткани .

Многие достижения в области генной инженерии стали результатом экспериментов с табаком . Основные достижения в культуре тканей и клеточных механизмах растений для широкого круга растений были достигнуты благодаря системам, разработанным в табаке. Это было первое растение, которое было изменено с помощью генной инженерии, и оно считается модельным организмом не только для генной инженерии, но и для ряда других областей. Таким образом, трансгенные инструменты и процедуры хорошо зарекомендовали себя, что делает табак одним из самых простых для трансформации растений. Другой крупный модельный организм, имеющий отношение к генной инженерии, - это Arabidopsis thaliana . Его небольшой геном и короткий жизненный цикл позволяют легко манипулировать им, и он содержит множество гомологов важным видам сельскохозяйственных культур. Это было первое секвенированное растение , доступно множество онлайн-ресурсов, и его можно трансформировать, просто окунув цветок в раствор трансформированной Agrobacterium .

В исследованиях растения разрабатывают, чтобы помочь обнаружить функции определенных генов. Самый простой способ сделать это - удалить ген и посмотреть, какой фенотип развивается по сравнению с формой дикого типа . Любые различия, возможно, связаны с отсутствием гена. В отличие от мутагенеза , генная инженерия позволяет целенаправленно удалять, не нарушая работу других генов в организме. Некоторые гены экспрессируются только в определенных тканях, поэтому репортерные гены, такие как GUS , могут быть прикреплены к интересующему гену, что позволяет визуализировать местоположение. Другой способ проверить ген - немного изменить его, а затем вернуть растению и посмотреть, оказывает ли он такое же влияние на фенотип. Другие стратегии включают прикрепление гена к сильному промотору и наблюдение за тем, что происходит, когда он сверхэкспрессируется, заставляя ген экспрессироваться в другом месте или на разных стадиях развития .

Suntory "голубая" роза

Некоторые генетически модифицированные растения являются чисто декоративными . Они модифицированы по цвету, аромату, форме цветка и архитектуре растений. Первые генетически модифицированные декоративные растения начали коммерциализацию измененного цвета. Гвоздики были выпущены в 1997 году, с наиболее популярных генетически модифицированного организма, голубой розы ( на самом деле сиреневого или лилового ) , созданный в 2004 году розы продаются в Японии, Соединенных Штатах и Канаде. Другие генетически модифицированные декоративные растения включают хризантемы и петунии . Помимо повышения эстетической ценности, есть планы по созданию декоративных растений, которые потребляют меньше воды или устойчивы к холоду, что позволит выращивать их вне естественной среды обитания.

Было предложено генетически модифицировать некоторые виды растений, которым угрожает исчезновение, чтобы они были устойчивыми к инвазивным растениям и болезням, например, изумрудный ясенелист в Северной Америке и грибковое заболевание Ceratocystis platani на европейских платанах . В папайи кольцевой пятнистости вирус опустошил папайи деревья на Гавайях в двадцатом веке до трансгенных папайи растений данного патогена , полученных сопротивление. Однако генетическая модификация для сохранения растений остается в основном спекулятивной. Уникальная проблема заключается в том, что трансгенный вид может больше не иметь достаточного сходства с исходным видом, чтобы действительно утверждать, что исходный вид сохраняется. Вместо этого трансгенные виды могут быть достаточно генетически разными, чтобы считаться новым видом, что снижает ценность генетической модификации для сохранения.

Посевы

Арахис дикого типа ( вверху ) и трансгенный арахис с добавленным геном Bacillus thuringiensis ( внизу ), подвергнутый воздействию личинки мотылька кукурузного стебля .

Генетически модифицированные культуры - это генетически модифицированные растения, которые используются в сельском хозяйстве . Первые выведенные культуры использовались в пищу для животных или человека и обеспечивали устойчивость к определенным вредителям, болезням, условиям окружающей среды, порче или химической обработке (например, устойчивость к гербицидам ). Второе поколение сельскохозяйственных культур было направлено на улучшение качества, часто за счет изменения профиля питательных веществ . Генетически модифицированные культуры третьего поколения могут использоваться для непродовольственных целей, включая производство фармацевтических агентов , биотоплива и других промышленно полезных товаров, а также для биоремедиации .

Кенийцы изучают устойчивую к насекомым трансгенную кукурузу Bacillus thuringiensis (Bt)

Развитие сельского хозяйства преследует три основные цели; увеличение производства, улучшение условий для сельскохозяйственных рабочих и устойчивость . ГМ-культуры вносят свой вклад в улучшение урожая за счет снижения нагрузки со стороны насекомых, повышения питательной ценности и устойчивости к различным абиотическим стрессам . Несмотря на этот потенциал, по состоянию на 2018 год коммерческие культуры ограничиваются в основном товарными культурами, такими как хлопок, соя, кукуруза и рапс, и подавляющее большинство интродуцированных признаков обеспечивают либо устойчивость к гербицидам, либо устойчивость к насекомым. На сою приходилась половина всех генетически модифицированных культур, посаженных в 2014 году. Принятие фермерами было быстрым, в период с 1996 по 2013 год общая площадь земель, возделываемых ГМ-культурами, увеличилась в 100 раз. Хотя географически распределение было неравномерным, с сильным ростом в Северной и Южной Америке и некоторых частях Азии и незначительным в Европе и Африке. Его социально-экономическое распространение было более равномерным: в 2013 году в развивающихся странах выращивалось примерно 54% ​​ГМ-культур во всем мире . Хотя были высказаны сомнения, большинство исследований показало, что выращивание ГМ-культур приносит пользу фермерам за счет сокращения использования пестицидов, а также увеличения урожая. урожайность и прибыль фермы.

Большинство ГМ-культур были модифицированы для обеспечения устойчивости к выбранным гербицидам, обычно на основе глифосата или глюфосината . Генетически модифицированные культуры, созданные для устойчивости к гербицидам, в настоящее время более доступны, чем устойчивые сорта, выведенные традиционным способом; в США 93% соевых бобов и большая часть выращиваемой ГМ кукурузы устойчивы к глифосату. Большинство доступных в настоящее время генов, используемых для создания устойчивости к насекомым, происходят от бактерии Bacillus thuringiensis и кодируют дельта-эндотоксины . Некоторые используют гены, кодирующие растительные инсектицидные белки . Единственный коммерчески используемый для защиты насекомых ген, который не происходит от B. thuringiensis, - это ингибитор трипсина коровьего гороха (CpTI). CpTI был впервые одобрен для использования с хлопком в 1999 году и в настоящее время проходит испытания на рисе. Менее одного процента ГМ-культур содержали другие признаки, в том числе обеспечение устойчивости к вирусам, задержку старения и изменение состава растений.

Золотой рис по сравнению с белым рисом

Золотой рис - это наиболее известная ГМ-культура, нацеленная на повышение питательной ценности. Он был разработан с использованием трех генов, которые биосинтезируют бета-каротин , предшественник витамина А , в съедобных частях риса. Он предназначен для производства обогащенных пищевых продуктов, которые будут выращиваться и потребляться в районах с дефицитом диетического витамина А , дефицит которого, по оценкам, ежегодно убивает 670 000 детей в возрасте до 5 лет и вызывает дополнительно 500 000 случаев необратимой детской слепоты. Первоначальный золотой рис производил 1,6 мкг / г каротиноидов , а при дальнейшей разработке этот показатель увеличился в 23 раза. Первые разрешения на использование в пищу он получил в 2018 году.

Растения и растительные клетки были генетически модифицированы для производства биофармацевтических препаратов в биореакторах. Этот процесс известен как фарминг . Была проведена работа с ряской Lemna minor , водорослями Chlamydomonas reinhardtii и мхом Physcomitrella patens . Производимые биофармацевтические препараты включают цитокины , гормоны , антитела , ферменты и вакцины, большая часть которых накапливается в семенах растений. Многие лекарства также содержат натуральные растительные ингредиенты, и пути, ведущие к их производству, были генетически изменены или переданы другим видам растений для производства большего объема. Другие варианты биореакторов - биополимеры и биотопливо . В отличие от бактерий, растения могут модифицировать белки посттрансляционно , что позволяет им создавать более сложные молекулы. Они также представляют меньший риск заражения. В трансгенных клетках моркови и табака выращивают терапевтические препараты, включая лекарственное средство для лечения болезни Гоше .

Производство и хранение вакцин имеет большой потенциал для трансгенных растений. Вакцины дороги в производстве, транспортировке и применении, поэтому наличие системы, которая может производить их на месте, обеспечит больший доступ к более бедным и развивающимся районам. Помимо очистки вакцин, экспрессированных в растениях, можно также производить съедобные вакцины из растений. Съедобные вакцины стимулируют иммунную систему при приеме внутрь для защиты от определенных заболеваний. Хранение в растениях снижает долгосрочные затраты, поскольку их можно распространять без необходимости хранения в холодильнике, они не нуждаются в очистке и имеют долгосрочную стабильность. Кроме того, присутствие в клетках растений обеспечивает некоторую защиту от кислот кишечника при пищеварении. Однако стоимость разработки, регулирования и содержания трансгенных растений высока, что приводит к тому, что большинство современных разработок вакцин на основе растений применяется в ветеринарии , где меры контроля не такие строгие.

Генетически модифицированные культуры были предложены в качестве одного из способов сокращения выбросов CO2, связанных с сельским хозяйством, благодаря более высокой урожайности, сокращению использования пестицидов, сокращению использования тракторного топлива и отсутствию обработки почвы. Согласно исследованию 2021 года, только в ЕС широкое внедрение генетически модифицированных культур сократит выбросы парниковых газов на 33 миллиона тонн эквивалента CO2 или 7,5% от общих выбросов, связанных с сельским хозяйством.

Животные

Подавляющее большинство генетически модифицированных животных находятся на стадии исследований, и их количество, близкое к выходу на рынок, остается небольшим. По состоянию на 2018 год были одобрены только три генетически модифицированных животных, все в США. Коза и курица были созданы для производства лекарств, а лосось увеличил свой собственный рост. Несмотря на различия и трудности их модификации, конечные цели во многом такие же, как и для растений. ГМ-животные созданы для исследовательских целей, производства промышленных или терапевтических продуктов, использования в сельском хозяйстве или улучшения их здоровья. Также существует рынок создания генетически модифицированных питомцев.

Млекопитающие

Некоторые химеры , такие как показанная мышь с пятнами, созданы с помощью методов генетической модификации, таких как нацеливание на гены .

Процесс генетической инженерии млекопитающих медленный, утомительный и дорогостоящий. Однако новые технологии делают генетические модификации проще и точнее. Первые трансгенные млекопитающие были получены путем инъекции вирусной ДНК в эмбрионы, а затем имплантации эмбрионов самкам. Эмбрион разовьется, и можно надеяться, что часть генетического материала будет включена в репродуктивные клетки. Затем исследователям пришлось бы подождать, пока животное не достигнет возраста размножения, а затем будет проверять потомство на наличие гена в каждой клетке. Разработка системы редактирования генов CRISPR-Cas9 как дешевого и быстрого способа прямого изменения половых клеток , эффективно сокращающего вдвое время, необходимое для создания генетически модифицированных млекопитающих.

Млекопитающие являются лучшими моделями болезней человека, поэтому генетически модифицированные модели жизненно важны для открытия и разработки лекарств и методов лечения многих серьезных заболеваний. Выключение генов, ответственных за генетические нарушения человека, позволяет исследователям изучить механизм заболевания и проверить возможные способы лечения. Генетически модифицированные мыши были наиболее распространенными млекопитающими, используемыми в биомедицинских исследованиях , поскольку они дешевы и просты в обращении. Свиньи также являются хорошей мишенью, поскольку они имеют схожий размер тела и анатомические особенности, физиологию , патофизиологическую реакцию и диету. Нечеловеческие приматы являются наиболее похожими модельными организмами на людей, но их использование в качестве исследовательских животных не так популярно. В 2009 году ученые объявили, что они впервые успешно передали ген приматам ( мартышкам ). Их первой целью исследования этих мартышек была болезнь Паркинсона , но они также рассматривали боковой амиотрофический склероз и болезнь Хантингтона .

Белки человека, экспрессируемые у млекопитающих, с большей вероятностью будут похожи на их естественные аналоги, чем белки, экспрессируемые в растениях или микроорганизмах. Стабильная экспрессия была достигнута у овец, свиней, крыс и других животных. В 2009 году был одобрен первый биологический препарат для человека, полученный из такого животного - козы . Препарат ATryn - это антикоагулянт, который снижает вероятность образования тромбов во время операции или родов и извлекается из козьего молока. Человеческий альфа-1-антитрипсин - это еще один белок, который вырабатывается козами и используется для лечения людей с этим дефицитом. Другая область медицины - создание свиней с большей способностью к трансплантации человеческих органов ( ксенотрансплантация ). Свиньи были генетически модифицированы, так что их органы больше не могут нести ретровирусы или иметь модификации, снижающие вероятность отторжения. Свиные легкие от генетически модифицированных свиней рассматриваются для трансплантации человеку. Есть даже потенциал для создания химерных свиней, которые могут нести человеческие органы.

Животноводство модифицируется с целью улучшения экономически важных характеристик, таких как скорость роста, качество мяса, состав молока, устойчивость к болезням и выживаемость. Животные созданы, чтобы расти быстрее, быть здоровее и противостоять болезням. Модификации также улучшили производство шерсти овец и здоровье вымени коров. Козы были генетически сконструированы для производства молока с сильными белками шелка, похожими на паутину. ГМ-свинья по имени Энвиропиг была создана со способностью переваривать растительный фосфор более эффективно, чем обычные свиньи. Они могут уменьшить загрязнение воды, так как выделяют на 30-70% меньше фосфора с навозом. Молочные коровы были генетически сконструированы для производства молока, аналогичного грудному грудному молоку. Это потенциально может принести пользу матерям, которые не могут производить грудное молоко, но хотят, чтобы их дети получали грудное молоко, а не смесь. Исследователи также создали генетически модифицированную корову, которая производит молоко, не вызывающее аллергии.

Мыши, экспрессирующие зеленый флуоресцентный белок

Ученые с помощью генной инженерии создали несколько организмов, в том числе некоторых млекопитающих, с включением зеленого флуоресцентного белка (GFP) для исследовательских целей. GFP и другие подобные сообщающие гены позволяют легко визуализировать и локализовать продукты генетической модификации. Флуоресцентные свиньи были выведены для изучения трансплантатов человеческих органов, регенерации глазных фоторецепторных клеток и других тем. В 2011 году были созданы зеленые флуоресцентные кошки, чтобы помочь найти методы лечения ВИЧ / СПИДа и других заболеваний, поскольку вирус иммунодефицита кошек связан с ВИЧ .

Были предположения, что с помощью генной инженерии можно вернуть животных от исчезновения . Он включает в себя изменение генома близкого родственника, чтобы он напоминал вымершего, и в настоящее время предпринимаются попытки со странствующим голубем . Гены, связанные с шерстистым мамонтом , были добавлены в геном африканского слона , хотя ведущий исследователь говорит, что у него нет намерения создавать живых слонов, а перенос всех генов и обращение вспять годы генетической эволюции далек от того, что возможно. Более вероятно, что ученые могли бы использовать эту технологию для сохранения находящихся под угрозой исчезновения животных, возвращая утраченное разнообразие или передавая развитые генетические преимущества от адаптированных организмов тем, кто борется.

Люди

Генная терапия использует генетически модифицированные вирусы для доставки генов, которые могут вылечить болезнь у людей. Хотя генная терапия все еще относительно нова, она добилась определенных успехов. Он использовался для лечения генетических заболеваний, таких как тяжелый комбинированный иммунодефицит и врожденный амавроз Лебера . Также разрабатываются методы лечения ряда других неизлечимых в настоящее время заболеваний, таких как муковисцидоз , серповидно-клеточная анемия , болезнь Паркинсона , рак , диабет , болезни сердца и мышечная дистрофия . Эти методы лечения влияют только на соматические клетки , а это означает, что любые изменения не передаются по наследству. Генная терапия зародышевой линии приводит к тому, что любые изменения передаются по наследству, что вызывает обеспокоенность в научном сообществе.

В 2015 году CRISPR использовался для редактирования ДНК нежизнеспособных человеческих эмбрионов . В ноябре 2018 года Хэ Цзянькуй объявил, что отредактировал геномы двух человеческих эмбрионов, пытаясь отключить ген CCR5 , который кодирует рецептор, который ВИЧ использует для проникновения в клетки. Он сказал, что девочки-близнецы, Лулу и Нана , родились несколькими неделями ранее, и что они несут функциональные копии CCR5 вместе с отключенным CCR5 ( мозаицизм ) и все еще уязвимы для ВИЧ. Работа была широко осуждена как неэтичная, опасная и преждевременная.

Рыба

При воздействии воды 13 ° C рыбки данио, модифицированные для экспрессии креатинкиназы карпа ( справа ), сохраняли плавательное поведение, в то время как рыбки данио дикого типа ( слева ) не могли.

Генетически модифицированная рыба используется в научных исследованиях, в качестве домашних животных и в качестве источника пищи. Аквакультура - это растущая отрасль, в настоящее время обеспечивающая более половины потребляемой рыбы во всем мире. С помощью генной инженерии можно увеличить темпы роста, уменьшить потребление пищи, устранить аллергенные свойства, повысить устойчивость к холоду и обеспечить устойчивость к болезням. Рыбу также можно использовать для обнаружения загрязнения водной среды или в качестве биореактора.

Несколько групп занимались разработкой рыбок данио для обнаружения загрязнения путем присоединения флуоресцентных белков к генам, активируемым присутствием загрязнителей. После этого рыба будет светиться, и ее можно будет использовать в качестве датчиков окружающей среды. Glofish является торговой маркой генетически модифицированного флуоресцентного данио с ярко - красный, зеленый и оранжевый флуоресцентный цвет. Первоначально он был разработан одной из групп для обнаружения загрязнения, но теперь он является частью торговли декоративной рыбой, став первым генетически модифицированным животным, которое стало общедоступным в качестве домашнего питомца, когда в 2003 году оно было введено в продажу в США.

ГМ-рыба широко используется в фундаментальных исследованиях в области генетики и развития. Два вида рыб, рыбок данио и медака , наиболее часто модифицируются, потому что они имеют оптически прозрачные хорионы (мембраны в яйце), быстро развиваются, а одноклеточный эмбрион легко увидеть и микроинъектировать трансгенной ДНК. Рыбки данио являются модельными организмами для процессов развития, регенерации , генетики, поведения, механизмов заболеваний и тестирования токсичности. Их прозрачность позволяет исследователям наблюдать стадии развития, функции кишечника и рост опухоли. Создание трансгенных протоколов (для всего организма, клеточных или тканевых, помеченных репортерными генами) увеличило уровень информации, получаемой при изучении этих рыб.

ГМ-рыба была разработана с промоторами, способствующими перепроизводству гормона роста, для использования в аквакультуре, чтобы увеличить скорость развития и потенциально снизить давление рыболовства на дикие запасы. Это привело к резкому ускорению роста нескольких видов, включая лосось , форель и тилапию . Биотехнологическая компания AquaBounty Technologies произвела лосося (так называемый лосось AquAdvantage ), который созревает вдвое быстрее , чем дикий лосось. В 2015 году он получил одобрение регулирующих органов, став первым продуктом, не содержащим ГМО, который будет коммерциализирован. По состоянию на август 2017 года в Канаде продается ГМО-лосось. Продажи в США стартовали в мае 2021 года.

Насекомые

Сверхэкспрессия из метил-CpG-связывающий белок 2 в Drosophila также препятствует способность преодолевать ( вправо ) по сравнению с контрольной группой ( слева ).

В биологических исследованиях трансгенные плодовые мухи ( Drosophila melanogaster ) представляют собой модельные организмы, используемые для изучения влияния генетических изменений на развитие. Дрозофилы часто предпочитают другим животным из-за их короткого жизненного цикла и низких требований к содержанию. У них также относительно простой геном по сравнению со многими позвоночными , обычно с одной копией каждого гена, что упрощает фенотипический анализ. Дрозофилы использовались для изучения генетики и наследования, эмбрионального развития, обучения, поведения и старения. Открытие транспозонов , в частности p-элемента , у Drosophila предоставило ранний метод добавления трансгенов в их геном, хотя это было принято более современными методами редактирования генов.

Из-за их важности для здоровья человека ученые ищут способы борьбы с комарами с помощью генной инженерии. Устойчивые к малярии комары были разработаны в лаборатории путем внедрения гена, который снижает развитие малярийного паразита, а затем с помощью самонаводящихся эндонуклеаз для быстрого распространения этого гена среди мужского населения (так называемый « генный драйв» ). Этот подход получил дальнейшее развитие, используя генный драйв для распространения летального гена. В ходе испытаний популяции комаров Aedes aegypti , наиболее важных переносчиков лихорадки денге и вируса Зика, сократились на 80–90%. Другой подход заключается в использовании метода стерильных насекомых , при котором самцы, генетически сконструированные таким образом, чтобы быть стерильными, конкурируют с жизнеспособными самцами, чтобы уменьшить численность популяции.

Другие насекомые-вредители, которые являются привлекательными целями, - это моль . Ежегодно во всем мире от моли Diamondback наносится ущерб от 4 до 5 миллиардов долларов США. Этот подход аналогичен методу стерилизации, испытанному на комарах, когда самцы трансформируются геном, который не позволяет родившимся самкам достичь зрелости. Они прошли полевые испытания в 2017 году. Генетически модифицированные бабочки ранее уже проходили полевые испытания. В данном случае штамм розовой совки , стерилизованный радиацией, был генетически модифицирован для экспрессии красного флуоресцентного белка, что облегчило исследователям их мониторинг.

Тутовый шелкопряд, стадия личинки Bombyx mori , является экономически важным насекомым в шелководстве . Ученые разрабатывают стратегии повышения качества и количества шелка. Существует также возможность использовать оборудование для производства шелка для производства других ценных белков. Белки, которые в настоящее время разрабатываются для экспрессии тутового шелкопряда, включают: человеческий сывороточный альбумин , человеческий коллаген α-цепь , мыши моноклональное антитело и N-гликаназа . Были созданы шелковые черви, которые производят паучий шелк , более прочный, но чрезвычайно трудный для сбора урожай, и даже новые шелка.

Другой

Лягушка, экспрессирующая зеленый флуоресцентный белок

Системы были разработаны для создания трансгенных организмов у множества других животных. Куры были генетически модифицированы для различных целей. Это включает в себя изучение развития эмбриона , предотвращение передачи птичьего гриппа и обеспечение понимания эволюции с использованием обратной инженерии для воссоздания фенотипов динозавров. ГМ-цыпленок, который производит препарат Канума , фермент, который лечит редкое заболевание, в своем яйце прошел одобрение регулирующих органов США в 2015 году. Генетически модифицированные лягушки, в частности Xenopus laevis и Xenopus tropicalis , используются в исследованиях биологии развития . ГМ-лягушки также могут использоваться в качестве датчиков загрязнения, особенно для химикатов, нарушающих работу эндокринной системы . Есть предложения использовать генную инженерию для борьбы с тростниковыми жабами в Австралии .

В нематоде Caenorhabditis Элеганс является одним из основных модельных организмов для исследования молекулярной биологии . РНК-интерференция (РНКи) была обнаружена у C. elegans и может быть вызвана простым кормлением их бактериями, модифицированными для экспрессии двухцепочечной РНК . Также относительно легко получить стабильных трансгенных нематод, и это наряду с РНКи является основным инструментом, используемым при изучении их генов. Наиболее частым использованием трансгенных нематод было изучение экспрессии и локализации генов путем присоединения репортерных генов. Трансгены также можно комбинировать с методами РНКи для спасения фенотипов, изучения функции генов, визуализации развития клеток в реальном времени или контроля экспрессии для различных тканей или стадий развития. Трансгенные нематоды использовались для изучения вирусов, токсикологии, болезней и обнаружения загрязнителей окружающей среды.

Трансгенная гидра, экспрессирующая зеленый флуоресцентный белок

Ген , ответственный за альбинизм в морских огурцов был найден и используется для конструирования белых морских огурцов , редкий деликатес. Технология также открывает путь к исследованию генов, ответственных за некоторые из более необычных черт огурцов, включая зимнюю спячку летом, потрошение кишечника и растворение их тел после смерти. Плоские черви могут восстанавливаться из одной клетки. До 2017 года не было эффективного способа их трансформировать, что затрудняло исследования. Используя микроинъекции и радиацию, ученые создали первых генетически модифицированных плоских червей. Щетина червь , морской кольчатый червь , был изменен. Он интересен тем, что его репродуктивный цикл синхронизирован с фазами Луны, регенерационной способностью и медленной скоростью эволюции. Книдарии, такие как гидра и морской анемон Nematostella vectensis, являются привлекательными модельными организмами для изучения эволюции иммунитета и некоторых процессов развития. Другие животные, которые были генетически модифицированы, включают улиток , гекконов , черепах , раков , устриц , креветок , моллюсков , морских ушек и губок .

Регулирование

Генетически модифицированные организмы регулируются государственными органами. Это относится к исследованиям, а также к выпуску генетически модифицированных организмов, в том числе сельскохозяйственных культур и продуктов питания. Разработка нормативной базы, касающейся генной инженерии, началась в 1975 году в Асиломаре , Калифорния. Встреча Asilomar рекомендуется набор руководящих принципов в отношении осторожного использования рекомбинантной технологии и любых продуктов , полученных от этой технологии. Картахенского протокола по биобезопасности был принят 29 января 2000 года и вступил в силу 11 сентября 2003 года Это международный договор , который регулирует передачу, обработку и использование генетически модифицированных организмов. Сто пятьдесят семь стран являются участниками Протокола, и многие используют его в качестве ориентира для своих собственных правил.

Университеты и исследовательские институты обычно имеют специальный комитет, который отвечает за одобрение любых экспериментов, связанных с генной инженерией. Для многих экспериментов также требуется разрешение национальной регулирующей группы или законодательства. Весь персонал должен быть обучен использованию ГМО, и все лаборатории должны получить одобрение своего регулирующего органа для работы с ГМО. Законодательство, касающееся ГМО, часто вытекает из правил и руководств, действующих в отношении не-ГМО версии организма, хотя они более строгие. Существует почти универсальная система оценки относительных рисков, связанных с ГМО и другими агентами, для лабораторного персонала и общества. Их относят к одной из четырех категорий риска в зависимости от их вирулентности, серьезности заболевания, способа передачи и доступности профилактических мер или лечения. Лаборатория может быть разделена на четыре уровня биобезопасности : от уровня 1 (который подходит для работы с агентами, не связанными с заболеванием) до уровня 4 (работа с опасными для жизни агентами). Разные страны используют разную номенклатуру для описания уровней и могут иметь разные требования к тому, что можно делать на каждом уровне.

Этикетка, обозначающая, что это арахисовое масло не содержит ГМО.
Фрагмент коробки французского сыра, декларирующий производство "без ГМО" (т.е. менее 0,9%)

Существуют различия в правилах выпуска ГМО между странами, причем некоторые из наиболее заметных различий наблюдаются между США и Европой. Регулирование варьируется в данной стране в зависимости от предполагаемого использования продуктов генной инженерии. Например, культура, не предназначенная для использования в пищевых продуктах, обычно не проверяется органами, отвечающими за безопасность пищевых продуктов. Некоторые страны запретили выпуск ГМО или ограничили их использование, а другие разрешают их с очень разной степенью регулирования. В 2016 году тридцать восемь стран официально запретили или запрещают выращивание ГМО, а девять (Алжир, Бутан, Кения, Кыргызстан, Мадагаскар, Перу, Россия, Венесуэла и Зимбабве) запретили их импорт. Большинство стран, которые не разрешают выращивание ГМО, разрешают исследования с использованием ГМО. Несмотря на регулирование, иногда имели место незаконные выпуски из-за слабости правоприменения.

Европейский Союз (ЕС) различает разрешение на выращивание в ЕС и разрешение на импорт и переработку. В то время как только несколько ГМО были одобрены для выращивания в ЕС, ряд ГМО одобрены для импорта и переработки. Выращивание ГМО вызвало дискуссию о рынке ГМО в Европе. В зависимости от правил сосуществования стимулы для выращивания ГМ-культур различаются. Политика США не уделяет этому процессу столько внимания, как другие страны, рассматривает поддающиеся проверке научные риски и использует концепцию существенной эквивалентности . Обсуждается, следует ли регулировать генно-отредактированные организмы так же, как генетически модифицированные организмы. Нормы США рассматривают их как отдельные и не регулируют их в одних и тех же условиях, в то время как в Европе ГМО - это любой организм, созданный с использованием методов генной инженерии.

Одним из ключевых вопросов, касающихся регулирующих органов, является вопрос о том, следует ли маркировать ГМ-продукты. Европейская комиссия говорит , что обязательная маркировка и прослеживаемость необходима для обеспечения обоснованного выбора, избежать возможной ложной рекламы и облегчить вывод продуктов , если неблагоприятные воздействия на здоровье и окружающей среду обнаружены. Американская медицинская ассоциация и Американская ассоциация содействия развитию науки говорят , что отсутствует научные доказательства вреда даже добровольное мечение в заблуждении и ложно потребители сигнализации. Маркировка ГМО-продуктов на рынке требуется в 64 странах. Маркировка может быть обязательной до порогового уровня содержания ГМ (который варьируется в зависимости от страны) или добровольным. В Канаде и США маркировка ГМО- продуктов питания является добровольной, в то время как в Европе все продукты питания (включая обработанные пищевые продукты ) или корма, содержащие более 0,9% одобренных ГМО, должны иметь маркировку. В 2014 году продажи продуктов, маркированных как не содержащие ГМО, выросли на 30 процентов до 1,1 миллиарда долларов.

Полемика

Существуют разногласия по поводу ГМО, особенно в отношении их выпуска за пределы лабораторных сред. В споре участвуют потребители, производители, биотехнологические компании, государственные регулирующие органы, неправительственные организации и ученые. Многие из этих проблем связаны с ГМ-культурами и безопасностью продуктов, произведенных из них, и о том, какое влияние их выращивание окажет на окружающую среду. Эти разногласия привели к судебным разбирательствам, международным торговым спорам и протестам, а также к ограничительному регулированию коммерческих продуктов в некоторых странах. Больше всего беспокоит воздействие ГМО на здоровье и окружающую среду. Сюда входит, могут ли они спровоцировать аллергическую реакцию , могут ли трансгены передаваться в клетки человека и могут ли гены, не одобренные для употребления в пищу человеком, проникнуть в продукты питания .

Протестующий, выступающий за маркировку ГМО

Существует научный консенсус в отношении того, что доступные в настоящее время продукты питания, полученные из ГМ-культур, не представляют большего риска для здоровья человека, чем обычные продукты питания, но что каждый ГМ-продукт необходимо тестировать в каждом конкретном случае перед введением. Тем не менее, представители общественности гораздо реже, чем ученые, считают генетически модифицированные продукты безопасными. Правовой и нормативный статус ГМ-продуктов варьируется в зависимости от страны: некоторые страны запрещают или ограничивают их, а другие разрешают их с сильно различающейся степенью регулирования.

Еще в 1990-х годах приток генов в дикие популяции считался маловероятным и редким, а если и произойдет, то легко искореним. Считалось, что это не повлечет за собой дополнительных экологических затрат или рисков - не ожидалось никаких других эффектов, кроме тех, которые уже были вызваны применением пестицидов. Однако за прошедшие десятилетия было обнаружено несколько таких примеров. Поток генов между ГМ-культурами и совместимыми растениями, наряду с более широким использованием гербицидов широкого спектра действия , может увеличить риск устойчивых к гербицидам популяций сорняков. Дебаты о масштабах и последствиях потока генов усилились в 2001 году, когда была опубликована статья, показывающая, что трансгены были обнаружены в кукурузе старомодных сортов в Мексике, центре разнообразия сельскохозяйственных культур . Было обнаружено, что поток генов от ГМ-культур к другим организмам обычно ниже, чем в естественных условиях. Чтобы решить некоторые из этих проблем, были разработаны некоторые ГМО с характеристиками, помогающими контролировать их распространение. Чтобы предотвратить случайное размножение генетически модифицированного лосося с диким лососем, вся рыба, выращиваемая в пищу, - это самки, триплоиды , 99% репродуктивно бесплодны и выращиваются в районах, где сбежавший лосось не может выжить. Бактерии также были изменены, чтобы они зависели от питательных веществ, которые не встречаются в природе, и была разработана технология ограничения генетического использования , хотя она еще не поступила в продажу, что делает второе поколение ГМ-растений стерильным.

Другие экологические и агрономические проблемы включают уменьшение биоразнообразия, увеличение числа вторичных вредителей (нецелевых вредителей) и эволюцию устойчивых насекомых-вредителей. В районах Китая и США, где выращиваются Bt-культуры, общее биоразнообразие насекомых увеличилось, а влияние вторичных вредителей было минимальным. Было обнаружено, что сопротивление проявляется медленно, если следовать передовым стратегиям. Воздействие Bt-культур на полезные нецелевые организмы стало общественной проблемой после того, как в статье 1999 г. было высказано предположение, что они могут быть токсичными для бабочек-монархов . Последующие исследования с тех пор показали, что уровни токсичности, встречающиеся в поле, были недостаточно высокими, чтобы нанести вред личинкам.

Обвинения в том, что ученые « разыгрывают бога » и другие религиозные проблемы , приписывались технологии с самого начала. Теперь, когда появилась возможность генетической инженерии людей, возникают этические опасения по поводу того, как далеко должна зайти эта технология и следует ли ее использовать вообще. Много споров вращается вокруг того, где проходит грань между лечением и улучшением, и должны ли модификации передаваться по наследству. Другие проблемы включают загрязнение негенетически модифицированных продуктов питания, строгость процесса регулирования, усиление контроля над поставками продуктов питания в компаниях, производящих и продающих ГМО, преувеличение преимуществ генетической модификации или опасения по поводу использования гербицидов. с глифосатом . Другие поднятые вопросы включают патентование жизни и использование прав интеллектуальной собственности .

Существуют большие различия в отношении восприятия ГМО потребителями, при этом европейцы с большей вероятностью относятся к ГМ-продуктам негативно, чем жители Северной Америки. ГМО появились на сцене, когда общественное доверие к безопасности пищевых продуктов, связанное с недавними проблемами, связанными с пищевыми продуктами, такими как губчатая энцефалопатия крупного рогатого скота и другие скандалы, связанные с государственным регулированием продуктов в Европе, было низким. Это наряду с кампаниями, проводимыми различными неправительственными организациями (НПО), было очень успешным в блокировании или ограничении использования ГМ-культур. НПО , как Ассоциация органических потребителей , в Союз обеспокоенных ученых , Greenpeace и другие группы сказали , что риски не были должным образом идентифицированы и управляются и что есть нерешенные вопросы , касающиеся потенциального долгосрочного воздействия на здоровье человека от пищевых продуктов , полученных из ГМО. Они предлагают обязательную маркировку или мораторий на такую ​​продукцию.

использованная литература

внешние ссылки