Культура клеток - Cell culture
Культура клеток - это процесс выращивания клеток в контролируемых условиях, как правило, за пределами их естественной среды. После того, как интересующие клетки были выделены из живой ткани , их можно поддерживать в тщательно контролируемых условиях. Эти условия различаются для каждого типа клеток, но обычно состоят из подходящего сосуда с субстратом или средой, которая поставляет необходимые питательные вещества ( аминокислоты , углеводы , витамины , минералы ), факторы роста , гормоны и газы ( CO 2 , O 2 ). , и регулирует физико-химическую среду ( буфер pH , осмотическое давление , температуру ). Большинству клеток требуется поверхность или искусственный субстрат (адгезивная или однослойная культура), тогда как другие можно выращивать свободно плавающими в культуральной среде ( суспензионная культура ). Продолжительность жизни большинства клеток определяется генетически, но некоторые клетки, выращивающие клетки, были «преобразованы» в бессмертные клетки, которые будут воспроизводиться бесконечно, если будут обеспечены оптимальные условия.
На практике, термин «культура клеток» относится теперь к культивированию клеток , полученных от многоклеточных эукариот , особенно животных клеток, в отличие от других типов культуры , которые также растут клетки, такие как культуры растительной ткани , грибковой культуры и микробиологической культуры ( от микробов ). Историческое развитие и методы культивирования клеток тесно взаимосвязаны с методами культивирования тканей и органов . Вирусная культура также связана с клетками как хозяевами вирусов.
Лабораторная методика сохранения живых клеточных линий (популяции клеток происходят от одной клетки и содержащие один и тот же генетический состав) отделены от их первоначальным источником ткани стал более устойчивым в середине 20 - го века.
История
Английский физиолог XIX века Сидней Рингер разработал солевые растворы, содержащие хлориды натрия, калия, кальция и магния, подходящие для поддержания биения изолированного сердца животного вне тела. В 1885 год Вильгельм Ру удалил часть медуллярной пластины из с эмбриональной курицей и поддерживал его в теплом физиологическом растворе в течение нескольких дней, устанавливая принцип тканевой культуры. Росс Грэнвилл Харрисон , работавший в Медицинской школе Джона Хопкинса, а затем в Йельском университете , опубликовал результаты своих экспериментов с 1907 по 1910 год, установив методологию культивирования тканей .
Методы культивирования клеток были значительно усовершенствованы в 1940-х и 1950-х годах для поддержки исследований в области вирусологии . Выращивание вирусов в культурах клеток позволило приготовить очищенные вирусы для производства вакцин . Инъекционная вакцина против полиомиелита, разработанная Джонасом Солком, была одним из первых продуктов, массово производимых с использованием методов культивирования клеток. Эта вакцина стала возможной благодаря исследованиям клеточных культур Джона Франклина Эндерса , Томаса Хакла Веллера и Фредерика Чепмена Роббинса , которые были удостоены Нобелевской премии за открытие метода выращивания вируса в культурах клеток почек обезьян .
Концепции в культуре клеток млекопитающих
Изоляция клеток
Клетки можно выделить из тканей для культуры ex vivo несколькими способами. Клетки легко очищаются от крови; однако в культуре могут расти только белые клетки . Клетки можно выделить из твердых тканей путем переваривания внеклеточного матрикса с использованием ферментов, таких как коллагеназа , трипсин или проназа , перед встряхиванием ткани для высвобождения клеток в суспензию. В качестве альтернативы кусочки ткани можно поместить в питательную среду , и вырастающие клетки доступны для культивирования. Этот метод известен как культура эксплантата .
Клетки, которые культивируются непосредственно от субъекта, известны как первичные клетки. За исключением некоторых, полученных из опухолей, большинство первичных культур клеток имеют ограниченную продолжительность жизни.
Установлено или иммортализованная клеточная линия приобрела способность к пролиферации на неопределенное время или через случайные мутации или преднамеренную модификацию, такие как искусственные экспрессии в теломеразах гена . Многочисленные клеточные линии хорошо известны как репрезентативные для конкретных типов клеток .
Поддержание клеток в культуре
Для большинства изолированных первичных клеток они претерпевают процесс старения и перестают делиться после определенного числа удвоений популяции, в целом сохраняя свою жизнеспособность (описанную как предел Хейфлика ).
Помимо температуры и газовой смеси, наиболее часто изменяемым фактором в системах культивирования является среда для роста клеток . Рецепты питательных сред могут различаться по pH , концентрации глюкозы, факторам роста и наличию других питательных веществ. Факторы роста, используемые для дополнения сред, часто получают из сыворотки крови животных, такой как фетальная бычья сыворотка (FBS), бычья телячья сыворотка, лошадиная сыворотка и свиная сыворотка. Одной из проблем, связанных с этими ингредиентами, полученными из крови, является возможность заражения культуры вирусами или прионами , особенно в приложениях медицинской биотехнологии . Текущая практика заключается в том, чтобы по возможности минимизировать или исключить использование этих ингредиентов и использовать лизат тромбоцитов человека (hPL). Это устраняет опасения по поводу межвидового загрязнения при использовании FBS с человеческими клетками. hPL стал безопасной и надежной альтернативой как прямая замена FBS или другой сыворотке животных. Кроме того, химически определенные среды можно использовать для удаления любых следов сыворотки (человека или животного), но это не всегда может быть достигнуто с разными типами клеток. Альтернативные стратегии включают получение крови животных из стран с минимальным риском BSE / TSE , таких как США, Австралия и Новая Зеландия, и использование очищенных концентратов питательных веществ, полученных из сыворотки, вместо цельной сыворотки животных для культивирования клеток.
Плотность посева (количество клеток на объем культуральной среды) играет решающую роль для некоторых типов клеток. Например, более низкая плотность посева заставляет клетки гранулезы вырабатывать эстроген, в то время как более высокая плотность посева заставляет их выглядеть как текалютеиновые клетки, продуцирующие прогестерон .
Клетки можно выращивать как в суспензии, так и в прикрепленных культурах. Некоторые клетки естественным образом живут в суспензии, не прикрепляясь к поверхности, например, клетки, существующие в кровотоке. Существуют также клеточные линии, которые были модифицированы для выживания в суспензионных культурах, чтобы их можно было выращивать до более высокой плотности, чем это позволяют условия прилипания. Адгезивным клеткам требуется поверхность, такая как пластик или микроноситель для тканевой культуры , которая может быть покрыта компонентами внеклеточного матрикса (такими как коллаген и ламинин) для повышения адгезионных свойств и обеспечения других сигналов, необходимых для роста и дифференцировки. Большинство клеток, происходящих из твердых тканей, являются адгезивными. Другой тип прилипшей культуры - это органотипическая культура, которая включает выращивание клеток в трехмерной (3-D) среде, а не в двумерных чашках для культивирования. Эта трехмерная система культивирования биохимически и физиологически больше похожа на ткань in vivo , но технически сложно поддерживать из-за многих факторов (например, диффузии).
Базальные среды для клеточных культур
Существуют различные виды сред для культивирования клеток, которые обычно используются в биологических науках, включая следующие:
Компоненты сред для культивирования клеток
Составная часть | Функция |
---|---|
Источник углерода ( глюкоза / глутамин ) | Источник энергии |
Аминокислота | Строительные блоки белка |
Витамины | Содействовать выживанию и росту клеток |
Сбалансированный солевой раствор | Изотоническая смесь ионов для поддержания оптимального осмотического давления внутри клеток и обеспечивает необходимые ионы металлов , чтобы действовать в качестве кофакторов для ферментативных реакций, клеточной адгезии и т.д. |
Феноловый красный краситель | индикатор pH . Цвет фенолового красного изменяется от оранжевого / красного при pH 7–7,4 до желтого при кислом (более низком) pH и пурпурного при основном (более высоком) pH. |
Бикарбонатный / HEPES буфер | Он используется для поддержания сбалансированного pH в среде. |
Типичные условия роста
Параметр | |
---|---|
Температура | 37 ° С |
СО2 | 5% |
Относительная влажность | 95% |
Перекрестное заражение клеточной линии
Перекрестное заражение клеточной линии может стать проблемой для ученых, работающих с культивируемыми клетками. Исследования показывают, что в 15–20% случаев клетки, используемые в экспериментах, были неправильно идентифицированы или загрязнены другой линией клеток. Проблемы с перекрестным заражением клеточных линий были обнаружены даже в линиях из панели NCI-60 , которые обычно используются для скрининговых исследований. Основные репозитории клеточных линий, включая Американскую коллекцию типовых культур (ATCC), Европейскую коллекцию клеточных культур (ECACC) и Немецкую коллекцию микроорганизмов и клеточных культур (DSMZ), получили от исследователей образцы клеточных линий, которые были ими неправильно идентифицированы. Такое заражение создает проблему для качества исследований, проводимых с использованием линий клеточных культур, и в настоящее время основные репозитории проводят аутентификацию всех представленных линий клеток. ATCC использует дактилоскопию ДНК с короткими тандемными повторами (STR) для аутентификации своих клеточных линий.
Чтобы решить эту проблему перекрестного заражения клеточных линий, исследователям рекомендуется аутентифицировать свои клеточные линии на раннем пассаже, чтобы установить идентичность клеточной линии. Аутентификацию следует повторять перед замораживанием запасов клеточных линий, каждые два месяца во время активного культивирования и перед публикацией данных исследований, полученных с использованием клеточных линий. Для идентификации клеточных линий используются многие методы, включая изоферментный анализ, типирование лимфоцитарного антигена человека (HLA), хромосомный анализ, кариотипирование, морфологию и STR-анализ .
Одним из значительных перекрестных контаминантов клеточных линий является бессмертная клеточная линия HeLa .
Прочие технические проблемы
Поскольку клетки обычно продолжают делиться в культуре, они обычно растут, заполняя доступную площадь или объем. Это может вызвать несколько проблем:
- Истощение питательных веществ в питательной среде
- Изменения pH среды для выращивания
- Накопление апоптотических / некротических (мертвых) клеток
- Контакт между клетками может стимулировать остановку клеточного цикла, заставляя клетки перестать делиться, что называется контактным ингибированием .
- Контакт между клетками может стимулировать клеточную дифференцировку .
- Генетические и эпигенетические изменения с естественным отбором измененных клеток, потенциально ведущим к чрезмерному росту аномальных, адаптированных к культуре клеток со сниженной дифференцировкой и повышенной пролиферативной способностью.
Выбор питательной среды может повлиять на физиологическую значимость результатов экспериментов с культурами клеток из-за различий в составе и концентрациях питательных веществ. Систематическая погрешность в сгенерированных наборах данных была недавно продемонстрирована для скринингов на подавление генов CRISPR и RNAi , а также для метаболического профилирования линий раковых клеток . Использование питательной среды, которая лучше отражает физиологические уровни питательных веществ, может улучшить физиологическую значимость исследований in vitro, и недавно были разработаны такие типы сред, как Plasmax и Human Plasma Like Medium (HPLM).
Манипуляции с культивируемыми клетками
Среди обычных манипуляций, выполняемых с культуральными клетками, - смена среды, пассирование клеток и трансфекция клеток. Обычно они выполняются с использованием методов культивирования тканей, основанных на асептических методах . Асептический метод направлен на предотвращение заражения бактериями, дрожжами или другими клеточными линиями. Манипуляции обычно выполняются в шкафу биобезопасности или ламинарном потоке, чтобы исключить контаминирующие микроорганизмы. В питательную среду также можно добавлять антибиотики (например, пенициллин и стрептомицин ) и противогрибковые препараты (например, амфотерицин B и раствор антибиотика-антимикотика ).
По мере того как клетки подвергаются метаболическим процессам, вырабатывается кислота и снижается pH. Часто в среду добавляют индикатор pH для измерения истощения питательных веществ.
Изменения в СМИ
В случае прилипших культур среда может быть удалена непосредственно путем аспирации, а затем заменена. Замена среды в неприлипающих культурах включает центрифугирование культуры и ресуспендирование клеток в свежей среде.
Проходящие клетки
Пассирование (также известное как субкультура или расщепление клеток) включает перенос небольшого количества клеток в новый сосуд. Клетки можно культивировать в течение более длительного времени, если их регулярно разделять, поскольку это позволяет избежать старения, связанного с длительной высокой плотностью клеток. Суспензионные культуры легко пассировать с небольшим количеством культуры, содержащей несколько клеток, разведенных в большем объеме свежей среды. В случае прилипших культур сначала необходимо отделить клетки; обычно это делается со смесью трипсин - ЭДТА ; однако в настоящее время для этой цели доступны другие смеси ферментов. Затем небольшое количество отделившихся клеток можно использовать для посева новой культуры. Некоторые клеточные культуры, такие как клетки RAW , механически соскребают с поверхности их сосудов резиновыми скребками.
Трансфекция и трансдукция
Другой распространенный метод манипулирования клетками включает введение чужеродной ДНК путем трансфекции . Это часто делается для того, чтобы клетки экспрессировали интересующий ген . Совсем недавно трансфекция конструкций РНКи была реализована как удобный механизм подавления экспрессии конкретного гена / белка. ДНК также может быть вставлена в клетки с использованием вирусов способами, называемыми трансдукцией , инфекцией или трансформацией . Вирусы как паразитарные агенты хорошо подходят для введения ДНК в клетки, поскольку это является частью их нормального процесса размножения.
Установленные линии клеток человека
Клеточные линии, происходящие от человека, вызывают несколько противоречий в биоэтике , поскольку они могут пережить свой родительский организм и позже использоваться для открытия прибыльных медицинских методов лечения. В новаторском решении в этой области Верховный суд Калифорнии постановил в деле Мур против Регентов Калифорнийского университета, что пациенты-люди не имеют прав собственности на клеточные линии, полученные из органов, удаленных с их согласия.
Можно слить нормальные клетки с иммортализованной клеточной линией . Этот метод используется для получения моноклональных антител . Вкратце, лимфоциты, выделенные из селезенки (или, возможно, крови) иммунизированного животного, объединяются с линией бессмертных миеломных клеток (линия B-клеток) для получения гибридомы, которая имеет антителоспецифичность первичных лимфоцитов и бессмертие миеломы. Среда для селективного роста (HA или HAT) используется для селекции против неслитых миеломных клеток; первичные лимфоузлы быстро погибают в культуре, и выживают только слитые клетки. Их проверяют на продукцию необходимого антитела, обычно сначала в пулах, а затем после однократного клонирования.
Штаммы клеток
Штамм клеток получают либо из первичной культуры, либо из линии клеток путем отбора или клонирования клеток, имеющих определенные свойства или характеристики, которые необходимо определить. Штаммы клеток - это клетки, которые были адаптированы для культивирования, но, в отличие от клеточных линий, обладают конечным потенциалом деления. Неиммортализованные клетки перестают делиться после 40-60 удвоений популяции и после этого теряют способность к размножению (генетически детерминированное событие, известное как старение).
Применение клеточной культуры
Массовое культивирование линий клеток животных является основой производства вирусных вакцин и других продуктов биотехнологии. Культура стволовых клеток человека используется для увеличения количества клеток и дифференциации клеток в различные типы соматических клеток для трансплантации. Культуру стволовых клеток также используют для сбора молекул и экзосом, которые высвобождают стволовые клетки в целях терапевтического развития.
Биологические продукты, полученные с помощью технологии рекомбинантной ДНК (рДНК) в культурах клеток животных, включают ферменты , синтетические гормоны , иммунобиологические препараты ( моноклональные антитела , интерлейкины , лимфокины ) и противораковые агенты . Хотя многие более простые белки могут быть получены с использованием рДНК в бактериальных культурах, более сложные белки, которые гликозилированы (модифицированы углеводами), в настоящее время должны производиться в клетках животных. Важным примером такого сложного белка является гормон эритропоэтин . Стоимость выращивания культур клеток млекопитающих высока, поэтому в настоящее время проводятся исследования по производству таких сложных белков в клетках насекомых или высших растений, использование отдельных эмбриональных клеток и соматических эмбрионов в качестве источника для прямого переноса генов посредством бомбардировки частицами, экспрессии транзитных генов и т. Д. конфокальная микроскопия - одно из его приложений. Он также предлагает подтвердить одноклеточное происхождение соматических зародышей и асимметрию первого клеточного деления, которое запускает процесс.
Культивирование клеток также является ключевым методом клеточного земледелия , цель которого - предоставить как новые продукты, так и новые способы производства существующих сельскохозяйственных продуктов, таких как молоко, (культивированное) мясо , ароматизаторы и рог носорога из клеток и микроорганизмов. Поэтому это считается одним из средств ведения сельского хозяйства без животных . Это также центральный инструмент для обучения клеточной биологии.
Культура клеток в двух измерениях
Исследования в области тканевой инженерии , стволовых клеток и молекулярной биологии в первую очередь включают культивирование клеток на плоских пластиковых тарелках. Этот метод известен как двумерная (2D) культура клеток и был впервые разработан Вильгельмом Ру, который в 1885 году удалил часть костномозговой пластинки эмбриональной курицы и выдержал ее в теплом физиологическом растворе в течение нескольких дней на плоском стекле. пластина. Благодаря развитию полимерных технологий возникла современная стандартная пластиковая чашка для двумерных культур клеток, широко известная как чашка Петри . Джулиус Рихард Петри , немецкий бактериолог , обычно приписывают это изобретение, когда он работал ассистентом Роберта Коха . Различные исследователи сегодня также используют лабораторные колбы для культивирования , конические сосуды и даже одноразовые пакеты, подобные тем, которые используются в одноразовых биореакторах .
Помимо чашек Петри, ученые уже давно выращивают клетки в биологически полученных матрицах, таких как коллаген или фибрин, а в последнее время - на синтетических гидрогелях, таких как полиакриламид или ПЭГ. Они делают это для того, чтобы вызвать фенотипы, которые не экспрессируются на традиционно жестких субстратах. Растет интерес к контролю жесткости матрицы , концепция, которая привела к открытиям в таких областях, как:
- Самообновление стволовых клеток
- Спецификация происхождения
- Фенотип раковых клеток
- Фиброз
- Функция гепатоцитов
- Механочувствительность
Клеточная культура в трех измерениях
Клеточная культура в трех измерениях рекламировалась как «новое измерение биологии». В настоящее время практика культивирования клеток по-прежнему основана на различных комбинациях одиночных или множественных клеточных структур в 2D. В настоящее время наблюдается рост использования трехмерных клеточных культур в исследовательских областях, включая открытие лекарств , биологию рака, регенеративную медицину , оценку наноматериалов и фундаментальные исследования в области наук о жизни . 3D-культуры клеток можно выращивать с использованием каркаса или матрицы или без каркаса. В культурах на основе каркасов используется бесклеточный трехмерный матрикс или жидкий матрикс. Методы без каркасов обычно создаются в суспензиях. Существует множество платформ, используемых для облегчения роста трехмерных ячеистых структур, включая системы каркасов, такие как гидрогелевые матрицы и твердые каркасы, и системы без каркасов, такие как пластины с низкой адгезией, магнитная левитация с использованием наночастиц и подвесные капельные пластины. Культивирование клеток в 3D приводит к широкому разнообразию сигнатур экспрессии генов и частично имитирует физиологические состояния тканей.
3D-культура клеток в каркасах
Эрик Саймон в отчете о гранте NIH SBIR за 1988 г. показал, что электроспиннинг может быть использован для производства полистирольных и поликарбонатных волокнистых каркасов нано- и субмикронного масштаба, специально предназначенных для использования в качестве субстратов для клеток in vitro . Это раннее использование электропряденых фиброзных решеток для клеточных культур и тканевой инженерии показало, что различные типы клеток, включая фибробласты крайней плоти человека (HFF), трансформированную карциному человека (HEp-2) и эпителий легких норки (MLE), будут прикрепляться к поликарбонатным волокнам и размножаться на них. . Было отмечено, что в отличие от уплощенной морфологии, обычно наблюдаемой в 2D-культуре, клетки, выращенные на электроспряденных волокнах, проявляли более гистотипическую округлую 3-мерную морфологию, обычно наблюдаемую in vivo .
3D-культура клеток в гидрогелях
Поскольку естественный внеклеточный матрикс (ECM) важен для выживания, пролиферации, дифференцировки и миграции клеток, различные матриксы гидрогелевых культур, имитирующие естественную структуру ECM, рассматриваются как потенциальные подходы к культивированию клеток, подобных in vivo. Гидрогели состоят из соединенных между собой пор с высоким удерживанием воды, что позволяет эффективно переносить такие вещества, как питательные вещества и газы. Для трехмерной клеточной культуры доступны несколько различных типов гидрогелей из природных и синтетических материалов, включая гидрогели экстрактов животных ЕСМ, белковые гидрогели, пептидные гидрогели, полимерные гидрогели и наноцеллюлозный гидрогель на основе древесины .
3D-культивирование клеток с помощью магнитной левитации
3D культивировань клетки с помощью магнитной левитации методы (MLM) является применением выращивания 3D ткани пути индуцирования клетки , обработанной с помощью магнитных наночастиц сборок в пространственно различных магнитных полей с использованием неодимовых магнитных драйверов и продвижения клетки к клетке взаимодействиям с помощью левитации клеток до воздуха / жидкая поверхность стандартной чашки Петри. Сборки магнитных наночастиц состоят из магнитных наночастиц оксида железа, наночастиц золота и полимера полилизина. Трехмерное культивирование клеток является масштабируемым, с возможностью культивирования от 500 клеток до миллионов клеток или от одной чашки до высокопроизводительных систем малого объема.
Тканевая культура и инженерия
Культура клеток является фундаментальным компонентом культуры тканей и тканевой инженерии , поскольку она устанавливает основы выращивания и поддержания клеток in vitro . Основное применение культуры клеток человека - производство стволовых клеток, где мезенхимальные стволовые клетки можно культивировать и замораживать для будущего использования. Тканевая инженерия потенциально предлагает кардинальные улучшения в недорогой медицинской помощи для сотен тысяч пациентов ежегодно.
Вакцина
Вакцины от полиомиелита , кори , эпидемического паротита , краснухи и ветрянки в настоящее время производятся на клеточных культурах. Из-за угрозы пандемии H5N1 исследования по использованию клеточных культур для противогриппозных вакцин финансируются правительством США . Новые идеи в этой области включают вакцины на основе рекомбинантной ДНК , например вакцины, созданные с использованием аденовируса человека (вируса простуды) в качестве вектора, и новые адъюванты.
Культура клеток в микрофлюидном устройстве
Культура клеток не млекопитающих
Помимо культуры хорошо зарекомендовавших себя иммортализованных клеточных линий, клетки из первичных эксплантов множества организмов можно культивировать в течение ограниченного периода времени до наступления старения (см. Предел Хейфлика). Культивируемые первичные клетки широко используются в исследованиях, как и в случае кератоцитов рыб в исследованиях миграции клеток.
Методы культивирования растительных клеток
Культуры растительных клеток обычно выращивают в виде суспензионных культур клеток в жидкой среде или в виде каллусных культур на твердой среде. Выращивание недифференцированных клеток растений и каллусов требует правильного баланса гормонов роста растений ауксина и цитокинина .
Культура клеток насекомых
Клетки, полученные из Drosophila melanogaster (в первую очередь, клетки Schneider 2 ), можно использовать для экспериментов, которые может быть трудно провести на живых мухах или личинках, таких как биохимические исследования или исследования с использованием миРНК . Клеточные линии, полученные от армейского червя Spodoptera frugiperda , включая Sf9 и Sf21 , и от петлителя капусты Trichoplusia ni , клетки High Five , обычно используются для экспрессии рекомбинантных белков с использованием бакуловируса .
Методы культивирования бактерий и дрожжей
Для бактерий и дрожжей небольшие количества клеток обычно выращивают на твердой подложке, содержащей встроенные в нее питательные вещества, обычно в геле, таком как агар, в то время как крупномасштабные культуры выращивают с клетками, суспендированными в питательном бульоне.
Методы вирусного культивирования
Для культивирования вирусов требуется культура клеток млекопитающих, растений, грибов или бактерий в качестве хозяев для роста и репликации вируса. Целые вирусы дикого типа , рекомбинантные вирусы или вирусные продукты могут быть получены в типах клеток, отличных от их естественных хозяев, при правильных условиях. В зависимости от вида вируса инфекция и репликация вируса могут привести к лизису клетки-хозяина и образованию вирусной бляшки .
Общие клеточные линии
- Линии клеток человека
- DU145 ( рак простаты )
- H295R ( рак надпочечников )
- HeLa ( рак шейки матки )
- КБМ-7 ( хронический миелолейкоз )
- LNCaP (рак простаты)
- MCF-7 ( рак груди )
- MDA-MB-468 (рак груди)
- PC3 (рак простаты)
- SaOS-2 ( рак кости )
- SH-SY5Y ( нейробластома , клонированная из миеломы )
- Т-47D (рак груди)
- THP-1 (острый миелоидный лейкоз )
- U87 ( глиобластома )
- Панель 60 раковых клеток Национального института рака ( NCI60 )
- Клеточные линии приматов
- Vero ( линия эпителиальных клеток почки Chlorocebus африканской зеленой обезьяны )
- Линии клеток мыши
- MC3T3 (эмбриональный свод черепа )
- Линии опухолевых клеток крыс
- GH3 ( опухоль гипофиза )
- PC12 ( феохромоцитома )
- Линии растительных клеток
- Клетки табака BY-2 (хранящиеся в виде суспензионной культуры клеток , они являются модельной системой растительной клетки)
- Клеточные линии других видов
Список клеточных линий
Клеточная линия | Имея в виду | Организм | Ткань происхождения | Морфология | Ссылки |
---|---|---|---|---|---|
3T3-L1 | «3-дневный перенос, инокулят 3 x 10 ^ 5 клеток» | Мышь | Эмбрион | Фибробласт | ECACC Целлозавр |
4Т1 | Мышь | Молочная железа | Целлозавр ATCC | ||
1321N1 | Человек | Головной мозг | Астроцитома | ECACC Целлозавр | |
9L | Крыса | Головной мозг | Глиобластома | ECACC Целлозавр | |
A172 | Человек | Головной мозг | Глиобластома | ECACC Целлозавр | |
A20 | Мышь | Лимфома B | В- лимфоцит | Целлозавр | |
A253 | Человек | Поднижнечелюстной проток | Рак головы и шеи | Целлозавр ATCC | |
A2780 | Человек | Яичник | Рак яичников | ECACC Целлозавр | |
A2780ADR | Человек | Яичник | Устойчивое к адриамицину производное A2780 | ECACC Целлозавр | |
A2780cis | Человек | Яичник | Цисплатин-устойчивое производное A2780 | ECACC Целлозавр | |
A431 | Человек | Эпителий кожи | Плоскоклеточная карцинома | ECACC Целлозавр | |
A549 | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
AB9 | Данио | Плавник | Фибробласт | Целлозавр ATCC | |
АХЛ-1 | Легкое армянского хомяка-1 | Хомяк | Легкое | ECACC Целлозавр | |
ALC | Мышь | Костный мозг | Строма | PMID 2435412 Целлозавр | |
B16 | Мышь | Меланома | ECACC Целлозавр | ||
B35 | Крыса | Нейробластома | Целлозавр ATCC | ||
BCP-1 | Человек | PBMC | ВИЧ + первичная выпотная лимфома | Целлозавр ATCC | |
BEAS-2B | Бронхиальный эпителий + гибрид вируса аденовируса 12-SV40 (Ad12SV40) | Человек | Легкое | Эпителиальный | ECACC Целлозавр |
bEnd.3 | Эндотелиальный мозг 3 | Мышь | Головной мозг / кора головного мозга | Эндотелий | Целлозавр |
BHK-21 | Почка детеныша хомяка-21 | Хомяк | Почка | Фибробласт | ECACC Целлозавр |
BOSC23 | Линия упаковки клеток, полученная из HEK 293 | Человек | Почки (эмбриональные) | Эпителий | Целлозавр |
БТ-20 | Опухоль груди-20 | Человек | Эпителий груди | Рак груди | Целлозавр ATCC |
BxPC-3 | Биопсийный ксенотрансплантат карциномы поджелудочной железы 3 линии | Человек | Аденокарцинома поджелудочной железы | Эпителиальный | ECACC Целлозавр |
C2C12 | Мышь | Миобласт | ECACC Целлозавр | ||
C3H-10T1 / 2 | Мышь | Линия эмбриональных мезенхимальных клеток | ECACC Целлозавр | ||
C6 | Крыса | Астроцит мозга | Глиома | ECACC Целлозавр | |
C6 / 36 | Насекомое - азиатский тигровый комар | Ткань личинки | ECACC Целлозавр | ||
Како-2 | Человек | Двоеточие | Колоректальный рак | ECACC Целлозавр | |
Кал-27 | Человек | Язык | Плоскоклеточная карцинома | Целлозавр ATCC | |
Calu-3 | Человек | Легкое | Аденокарцинома | Целлозавр ATCC | |
CGR8 | Мышь | Эмбриональные стволовые клетки | ECACC Целлозавр | ||
CHO | Яичник китайского хомяка | Хомяк | Яичник | Эпителий | ECACC Целлозавр |
CML T1 | Хронический миелолейкоз Т-лимфоцит 1 | Человек | Острая фаза ХМЛ | Лейкоз Т-клеток | DSMZ Целлозавр |
CMT12 | Опухоль молочной железы у собак 12 | Собака | Молочная железа | Эпителий | Целлозавр |
COR-L23 | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
COR-L23 / 5010 | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
COR-L23 / CPR | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
COR-L23 / R23- | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
COS-7 | Cercopithecus aethiops , дефект по происхождению SV-40 | Обезьяна Старого Света - Cercopithecus aethiops ( Chlorocebus ) | Почка | Фибробласт | ECACC Целлозавр |
COV-434 | Человек | Яичник | Гранулезно-клеточная карцинома яичников | PMID 8436435 ECACC Целлозавр | |
CT26 | Мышь | Двоеточие | Колоректальный рак | Целлозавр | |
D17 | Собака | Метастазы в легкие | Остеосаркома | Целлозавр ATCC | |
ДАОЙ | Человек | Головной мозг | Медуллобластома | Целлозавр ATCC | |
DH82 | Собака | Гистиоцитоз | Моноциты / макрофаги | ECACC Целлозавр | |
DU145 | Человек | Карцинома простаты, нечувствительная к андрогенам | Целлозавр ATCC | ||
DuCaP | Рак твердой мозговой оболочки простаты | Человек | Метастатическая карцинома простаты | Эпителиальный | PMID 11317521 Целлозавр |
E14Tg2a | Мышь | Эмбриональные стволовые клетки | ECACC Целлозавр | ||
EL4 | Мышь | Лейкоз Т-клеток | ECACC Целлозавр | ||
ЭМ-2 | Человек | Взрывной кризис ХМЛ | Линия Ph + CML | DSMZ Целлозавр | |
ЭМ-3 | Человек | Взрывной кризис ХМЛ | Линия Ph + CML | DSMZ Целлозавр | |
EMT6 / AR1 | Мышь | Молочная железа | Эпителиально-подобный | ECACC Целлозавр | |
EMT6 / AR10.0 | Мышь | Молочная железа | Эпителиально-подобный | ECACC Целлозавр | |
FM3 | Человек | Метастазы в лимфатические узлы | Меланома | ECACC Целлозавр | |
GL261 | Глиома 261 | Мышь | Головной мозг | Глиома | Целлозавр |
H1299 | Человек | Легкое | Карцинома легкого | Целлозавр ATCC | |
HaCaT | Человек | Кожа | Кератиноциты | CLS Целлозавр | |
HCA2 | Человек | Двоеточие | Аденокарцинома | ECACC Целлозавр | |
HEK 293 | Эмбриональная почка человека 293 | Человек | Почки (эмбриональные) | Эпителий | ECACC Целлозавр |
HEK 293T | Производное HEK 293 | Человек | Почки (эмбриональные) | Эпителий | ECACC Целлозавр |
HeLa | "Генриетта Лакс" | Человек | Эпителий шейки матки | Рак шейки матки | ECACC Целлозавр |
Hepa1c1c7 | Клон 7 клона 1 гепатомы линии 1 | Мышь | Гепатома | Эпителиальный | ECACC Целлозавр |
Hep G2 | Человек | Печень | Гепатобластома | ECACC Целлозавр | |
Дай пять | Насекомое (моль) - Trichoplusia ni | Яичник | Целлозавр | ||
HL-60 | Лейкемия человека-60 | Человек | Кровь | Миелобласт | ECACC Целлозавр |
HT-1080 | Человек | Фибросаркома | ECACC Целлозавр | ||
HT-29 | Человек | Эпителий толстой кишки | Аденокарцинома | ECACC Целлозавр | |
J558L | Мышь | Миелома | В-лимфоцитарная клетка | ECACC Целлозавр | |
Юркат | Человек | белые кровяные клетки | Т - клеток лейкемии | ECACC Целлозавр | |
JY | Человек | Лимфобластоидный | В-клетка, трансформированная EBV | ECACC Целлозавр | |
K562 | Человек | Лимфобластоидный | Взрывной кризис ХМЛ | ECACC Целлозавр | |
КБМ-7 | Человек | Лимфобластоидный | Взрывной кризис ХМЛ | Целлозавр | |
KCL-22 | Человек | Лимфобластоидный | CML | DSMZ Целлозавр | |
KG1 | Человек | Лимфобластоидный | AML | ECACC Целлозавр | |
Ku812 | Человек | Лимфобластоидный | Эритролейкоз | ECACC Целлозавр | |
KYO-1 | Киото-1 | Человек | Лимфобластоидный | CML | DSMZ Целлозавр |
L1210 | Мышь | Лимфоцитарный лейкоз | Асцитическая жидкость | ECACC Целлозавр | |
L243 | Мышь | Гибридома | Секретирует L243 mAb (против HLA-DR) | Целлозавр ATCC | |
LNCaP | Рак лимфатических узлов предстательной железы | Человек | Аденокарцинома простаты | Эпителиальный | ECACC Целлозавр |
MA-104 | Microbiological Associates-104 | Африканская зеленая обезьяна | Почка | Эпителиальный | Целлозавр |
MA2.1 | Мышь | Гибридома | Секретирует MA2.1 mAb (против HLA-A2 и HLA-B17) | Целлозавр ATCC | |
Ма-Мел 1, 2, 3 .... 48 | Человек | Кожа | Ряд клеточных линий меланомы | ECACC Целлозавр | |
МС-38 | Мышь Колон-38 | Мышь | Двоеточие | Аденокарцинома | Целлозавр |
MCF-7 | Онкологический фонд Мичигана-7 | Человек | Грудь | Инвазивная протоковая карцинома молочной железы ER +, PR + | ECACC Целлозавр |
MCF-10A | Онкологический фонд Мичигана-10A | Человек | Эпителий груди | Целлозавр ATCC | |
MDA-MB-157 | Доктор медицины Андерсон - Метастатическая грудь-157 | Человек | Метастазирование плеврального выпота | Рак груди | ECACC Целлозавр |
MDA-MB-231 | Доктор медицины Андерсон - Метастатическая грудь-231 | Человек | Метастазирование плеврального выпота | Рак груди | ECACC Целлозавр |
MDA-MB-361 | Доктор медицины Андерсон - Метастатическая грудь-361 | Человек | Меланома (зараженная M14) | ECACC Целлозавр | |
MDA-MB-468 | Доктор медицины Андерсон - Метастатическая грудь-468 | Человек | Метастазирование плеврального выпота | Рак груди | Целлозавр ATCC |
MDCK II | Собачья почка Madin Darby II | Собака | Почка | Эпителий | ECACC Целлозавр |
MG63 | Человек | Кость | Остеосаркома | ECACC Целлозавр | |
MIA PaCa-2 | Человек | Простата | Карцинома поджелудочной железы | Целлозавр ATCC | |
MOR / 0,2R | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
Моно-Мак-6 | Человек | белые кровяные клетки | Миелоидный метаплазический ОМЛ | DSMZ Целлозавр | |
MRC-5 | Штамм клеток 5 Совета по медицинским исследованиям | Человек | Легкое (плод) | Фибробласт | ECACC Целлозавр |
МТД-1А | Мышь | Эпителий | Целлозавр | ||
MyEnd | Эндотелиальный миокард | Мышь | Эндотелий | Целлозавр | |
NCI-H69 | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
NCI-H69 / CPR | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
NCI-H69 / LX10 | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
NCI-H69 / LX20 | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
NCI-H69 / LX4 | Человек | Легкое | Карцинома легкого | ECACC Целлозавр | |
Нейро-2а | Мышь | Нерв / нейробластома | Нейрональные стволовые клетки | ECACC Целлозавр | |
NIH-3T3 | NIH , 3-дневный перенос, инокулят 3 x 10 5 клеток | Мышь | Эмбрион | Фибробласт | ECACC Целлозавр |
НАЛМ-1 | Человек | Периферическая кровь | Взрыво-кризисный ХМЛ | Целлозавр ATCC | |
НК-92 | Человек | Лейкоз / лимфома | Целлозавр ATCC | ||
НТЕРА-2 | Человек | Метастазы в легкие | Эмбриональная карцинома | ECACC Целлозавр | |
NW-145 | Человек | Кожа | Меланома | ESTDAB Целлозавр | |
Ok | Почка опоссума | Вирджиния опоссум - Didelphis virginiana | Почка | ECACC Целлозавр | |
Клеточные линии OPCN / OPCT | Человек | Простата | Диапазон опухолевых линий простаты | Целлозавр | |
P3X63Ag8 | Мышь | Миелома | ECACC Целлозавр | ||
ПАНК-1 | Человек | Воздуховод | Эпителиоидная карцинома | Целлозавр ATCC | |
PC12 | Крыса | Мозговое вещество надпочечников | Феохромоцитома | ECACC Целлозавр | |
ПК-3 | Рак простаты-3 | Человек | Костный метастаз | Карцинома простаты | ECACC Целлозавр |
Вглядеться | Человек | Лейкоз Т-клеток | DSMZ Целлозавр | ||
PNT1A | Человек | Простата | Линия опухоли, трансформированная SV40 | ECACC Целлозавр | |
PNT2 | Человек | Простата | Линия опухоли, трансформированная SV40 | ECACC Целлозавр | |
Pt K2 | Вторая линия клеток, полученная из Potorous tridactylis | Длинноносый потороо - Potorous tridactylus | Почка | Эпителиальный | ECACC Целлозавр |
Раджи | Человек | Лимфома B | Лимфобластоподобный | ECACC Целлозавр | |
РБЛ-1 | Базофильный лейкоз крысы-1 | Крыса | Лейкемия | Базофильная клетка | ECACC Целлозавр |
RenCa | Почечная карцинома | Мышь | Почка | Карцинома почки | Целлозавр ATCC |
РИН-5Ф | Мышь | Поджелудочная железа | ECACC Целлозавр | ||
RMA-S | Мышь | Т-клеточная опухоль | Целлозавр | ||
S2 | Шнайдер 2 | Насекомое - Drosophila melanogaster | Эмбрионы поздней стадии (возраст 20–24 часа) | Целлозавр ATCC | |
SaOS-2 | Саркома OSteogenic-2 | Человек | Кость | Остеосаркома | ECACC Целлозавр |
Sf21 | Spodoptera frugiperda 21 | Насекомое (моль) - Spodoptera frugiperda. | Яичник | ECACC Целлозавр | |
Sf9 | Spodoptera frugiperda 9 | Насекомое (моль) - Spodoptera frugiperda. | Яичник | ECACC Целлозавр | |
SH-SY5Y | Человек | Метастазы в костный мозг | Нейробластома | ECACC Целлозавр | |
SiHa | Человек | Эпителий шейки матки | Рак шейки матки | Целлозавр ATCC | |
СК-БР-3 | Рак груди Слоана-Кеттеринга 3 | Человек | Грудь | Рак груди | DSMZ Целлозавр |
СК-ОВ-3 | Рак яичников Слоуна-Кеттеринга 3 | Человек | Яичник | Рак яичников | ECACC Целлозавр |
СК-Н-Ш | Человек | Головной мозг | Эпителиальный | Целлозавр ATCC | |
Т2 | Человек | Т-клеточный лейкоз / гибридома В-клеточной линии | Целлозавр ATCC | ||
Т-47Д | Человек | Грудь | Карцинома молочной железы | ECACC Целлозавр | |
T84 | Человек | Метастазы в легкие | Колоректальный рак | ECACC Целлозавр | |
T98G | Человек | Глиобластома-астроцитома | Эпителий | ECACC Целлозавр | |
THP-1 | Человек | Моноцит | Острый моноцитарный лейкоз | ECACC Целлозавр | |
U2OS | Человек | Остеосаркома | Эпителиальный | ECACC Целлозавр | |
U373 | Человек | Глиобластома-астроцитома | Эпителий | ECACC Целлозавр | |
U87 | Человек | Глиобластома-астроцитома | Эпителиально-подобный | ECACC Целлозавр | |
U937 | Человек | Лейкозная моноцитарная лимфома | ECACC Целлозавр | ||
VCaP | Позвоночный рак простаты | Человек | Метастаз в позвонке | Карцинома простаты | ECACC Целлозавр |
Vero | С эсперанто: verda (зеленый, для зеленой обезьяны), reno (почка) | Африканская зеленая обезьяна - Chlorocebus sabaeus | Эпителий почек | ECACC Целлозавр | |
ВГ-1 | Человек | Первичная выпотная лимфома | Целлозавр | ||
WM39 | Человек | Кожа | Меланома | ESTDAB Целлозавр | |
WT-49 | Человек | Лимфобластоидный | ECACC Целлозавр | ||
ЯК-1 | Мышь | Лимфома | ECACC Целлозавр | ||
ЯР | Человек | Лимфобластоидный | В-клетка, трансформированная EBV | Иммунология человека ECACC Целлозавр |
Смотрите также
- Биологическое бессмертие
- Анализы клеточных культур
- Измерение импеданса электрического элемента и подложки
- Список зараженных клеточных линий
- Список сотовых линий NCI-60
- Список клеточных линий рака груди
- Микрофизиометрия
Ссылки и примечания
дальнейшее чтение
- Пейси Л., Стед С., Глив Дж, Томчик К., Деринг Л. (2006). «Культура нервных стволовых клеток: создание нейросферы, микроскопический анализ и криоконсервация». Обмен протоколами . DOI : 10.1038 / nprot.2006.215 .
- Gilabert JA, Montalvo GB, Artalejo AR (2006). «Первичные культуры хромаффинных клеток крысы: стандартизация и оценка качества для одноклеточных анализов». Обмен протоколами . DOI : 10.1038 / nprot.2006.294 .
- Лосардо Р.Дж., Крус-Гутьеррес Р., Пратес Дж. К., Московичи М., Родригес-Торрес А., Артеага-Мартинес М. (2015). "Сергей Федоров: пионер регенерации нейронов. Дань уважения Панамериканской ассоциации анатомии" . Международный журнал морфологии . 33 (2): 794. DOI : 10,4067 / S0717-95022015000200059 .
- MacLeod RA, Dirks WG, Matsuo Y, Kaufmann M, Milch H, Drexler HG (ноябрь 1999 г.). «Широко распространенное внутривидовое перекрестное заражение линий опухолевых клеток человека, возникающее у источника» . Международный журнал рака . 83 (4): 555–63. DOI : 10.1002 / (SICI) 1097-0215 (19991112) 83: 4 <555 :: AID-IJC19> 3.0.CO; 2-2 . PMID 10508494 .
- Мастерс-младший (апрель 2002 г.). «Клетки HeLa спустя 50 лет: хорошие, плохие и уродливые». Обзоры природы. Рак . 2 (4): 315–9. DOI : 10.1038 / nrc775 . PMID 12001993 . S2CID 991019 .
- Витковский Я.А. (июль 1983 г.). «Экспериментальная патология и истоки культуры тканей: вклад Лео Леба» . История болезни . 27 (3): 269–88. DOI : 10.1017 / S0025727300042964 . PMC 1139336 . PMID 6353093 .
внешние ссылки
Библиотечные ресурсы о клеточной культуре |
- Таблица общих клеточных линий из 4-го изд. Альберта.
- Раковые клетки в культуре
- Эволюция поверхности клеточной культуры
- Гипертекстовая версия базы данных сотовой связи
- Справочник по культуре клеток микроносителей от GE Healthcare Life Sciences
- Приложения для клеточных культур - ресурсы, включая заметки по приложениям и протоколы, с самого начала для создания идеальной среды для выращивания клеток.
- Основы клеточной культуры - Введение в клеточную культуру, охватывающее такие темы, как устройство лаборатории, безопасность и асептические методы, включая основные протоколы культивирования клеток и видео-тренинг
- База данных о том, кто есть кто в культуре клеток и связанных исследованиях
- Хранилища ячеек Coriell
- Справочник по стратегиям очистки белков
- Введение в культуру клеток. Этот веб-семинар знакомит с историей, теорией, основными методами и потенциальными ямами культуры клеток млекопитающих.
- Национальный центр клеточных исследований (NCCS), Пуна, Индия; национальный репозиторий клеточных линий / гибридом и т. д.
- Общественное здравоохранение Англии , Коллекции культур общественного здравоохранения Англии (ECACC)